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文檔簡介
1、隨著對糖尿病與肥胖癥認(rèn)識的不斷深入,肥胖和2型糖尿病之間的聯(lián)系也越來越明確。肥胖和2型糖尿病的共同特征之一為血漿游離脂肪酸(FFAs)水平升高。最近一些研究表明,PTEN在胰島素代謝中起重要作用,有關(guān)PTEN是否參與FFAs對胰島β細(xì)胞功能的損害尚未見報(bào)道;近來發(fā)現(xiàn),解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)及線粒體與游離脂肪酸引起的胰島β細(xì)胞功能障礙有關(guān),但是其具體機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)對此作初步研究。 目的:通過觀察游離脂肪酸(FFAs)對胰島
2、β細(xì)胞PTENmRNA、線粒體膜電位和UCP2表達(dá)的慢性影響,探討FFAs損害胰島β細(xì)胞功能的機(jī)制。 方法:將0mmol/L,0.3mmol/L,0.4mmol/L,0.5mmol/L油酸作用于培養(yǎng)的胰島βTC3細(xì)胞: 1.用放射免疫法檢測基礎(chǔ)和葡萄糖刺激的胰島素分泌量(GSIS); 2.MTT法分析細(xì)胞增殖能力; 3.RT-PCR法分析PTENmRNA的表達(dá)量; 4.膜片鉗技術(shù)檢測ATP敏感鉀電
3、流(IKATP); 5.流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測線粒體膜電位; 6.RT-PCR和Westernblot方法分析UCP2表達(dá)。 7.油酸和PPARγ配體羅格列酮共同作用于培養(yǎng)的胰島βTC3細(xì)胞,觀察UCP2mRNA和蛋白表達(dá)。 結(jié)論:結(jié)果表明,F(xiàn)FAs對胰島β細(xì)胞內(nèi)PTEN的表達(dá)和線粒體功能具有影響;在FFAs引起的胰島β胞功能障礙中,F(xiàn)FAs一方面通過增加PTEN的表達(dá),從而導(dǎo)致KATP開放而減少胰島素
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