游離脂肪酸致胰島素抵抗的作用機(jī)制.pdf

1、目的該研究利用3T3-L1細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞;同時(shí)用密度梯度離心和貼壁培養(yǎng)方法對大鼠MSC進(jìn)顯影響.FFA以劑量和時(shí)間依賴的方式削弱了3T3-L1脂肪細(xì)胞胰島素信號行分離培養(yǎng)和表面抗原鑒定,建立體外定向誘導(dǎo)MSC分化為脂肪細(xì)胞的方法;并對這兩種通過體外定向誘導(dǎo)分化來得到大量成熟脂肪細(xì)胞的方法加以比較,探索以脂肪細(xì)胞為模型研究其在內(nèi)分泌系統(tǒng)的作用的新途徑.該研究還選擇了有代表性的FFA-軟脂酸(palmitic acid,PA)和

2、油酸(oleic acid,OA),觀察不同種類和濃度的FFA對3T3-L1脂肪細(xì)胞葡萄糖攝取及胰島素敏感性的影響,建立FFA誘導(dǎo)的胰島素抵抗的細(xì)胞模型;并進(jìn)一步觀察FFA對胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的關(guān)鍵蛋白PI-3K和PKB的蛋白表達(dá)和PKB磷酸化水平(p-PKB)的影響、FFA對GLUT4基因表達(dá)、蛋白表達(dá)及轉(zhuǎn)位的影響.結(jié)論1.3T3-L1細(xì)胞可在體外穩(wěn)定誘導(dǎo)分化為成熟脂肪細(xì)胞.2.大鼠MSC穩(wěn)定表達(dá)CD44、CD54、CD106,經(jīng)體

3、外定向誘導(dǎo)可分化為脂肪細(xì)胞.3.FFA以時(shí)間和濃度依賴性的方式抑制3T3-L1脂肪細(xì)胞胰島素刺激后的葡萄糖特異性轉(zhuǎn)運(yùn),并在高濃度時(shí)抑制基礎(chǔ)狀態(tài)下的葡萄糖特異性轉(zhuǎn)運(yùn).4.FFA誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗,成為胰島素抵抗細(xì)胞模型,隨FFA作用時(shí)間的延長和濃度的增加,胰島素抵抗的程度加重.5.FFA對3T3-L1脂肪細(xì)胞胰島素信號蛋白PI-3K p85α和PKB的蛋白表達(dá)無明蛋白PKB的磷酸化水平.FFA導(dǎo)致胰島素抵抗的機(jī)制與其影