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1、目的:通過(guò)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)為虎苓貼膏臨床治療化膿性關(guān)節(jié)炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)一通過(guò)體外抑菌實(shí)驗(yàn),檢驗(yàn)虎苓貼膏煎劑對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用;實(shí)驗(yàn)二通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),探討虎苓貼膏對(duì)化膿性關(guān)節(jié)炎模型兔血液中性粒細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白和關(guān)節(jié)滑膜的影響,驗(yàn)證其對(duì)化膿性關(guān)節(jié)炎的有效性。
方法:首先進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn),定性實(shí)驗(yàn)(瓊脂擴(kuò)散紙片法)確定虎苓貼膏煎劑對(duì)金黃色葡萄球菌是否有抑制作用;定量實(shí)驗(yàn)(平板稀釋法)檢測(cè)不同濃度下虎苓貼膏煎劑對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制
2、情況。然后進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn),將60只新西蘭大耳兔隨機(jī)分成為6組,A組空白對(duì)照組(不做任何處理),B組造模對(duì)照組(造模成功后不做處理),C組虎苓貼膏組(造模成功后外敷虎苓貼膏),D組青霉素組(造模成功后肌注青霉素),E組青霉素加虎苓貼膏組(造模成功后外敷虎苓貼膏并且肌注青霉素),F(xiàn)組預(yù)防組(注射細(xì)菌后外敷虎苓貼膏)。給藥方法:造模成功后開始給藥,膏藥用法是分別以造模進(jìn)針點(diǎn)為中心,外敷虎苓貼膏,面積包繞膝關(guān)節(jié)為度,每日一次(相當(dāng)于成人每曰每次用
3、量1/3),連續(xù)給藥2周。青霉素組給予肌肉注射青霉素40萬(wàn)單位,每日兩次(相當(dāng)于成人每日每次用量1/3),連續(xù)給藥2周??瞻捉M及模型組未予給藥;預(yù)防組在注射細(xì)菌后外敷虎苓貼膏。造模方法采用左膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入金黃色葡萄球菌懸液造模法,于造模前、造模成功時(shí)及用藥第一周和第二周觀測(cè)兔:飲食、體溫、心率,肢體腫脹程度、運(yùn)動(dòng)情況;實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目:血常規(guī)(白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞)、CRP、血沉等指標(biāo)的變化;運(yùn)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析。實(shí)驗(yàn)完畢后用空氣
4、栓塞法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死,解剖分離出患肢滑膜,行滑膜組織病理檢驗(yàn)。
結(jié)果:體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果:定性實(shí)驗(yàn),可以通過(guò)抑菌圈的直徑看到對(duì)細(xì)菌的抑制作用;定量實(shí)驗(yàn),可以直觀看到不同濃度虎苓貼膏煎劑均對(duì)金黃色葡萄球菌有抑制作用,最小抑菌濃度為0.125g/ml。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果:造模2周后,造模動(dòng)物均見(jiàn)左膝關(guān)節(jié)腫大(均超過(guò)1cm),左側(cè)肢體活動(dòng)障礙、食量下降、左膝關(guān)節(jié)局部體溫升高等;血常規(guī)示:白細(xì)胞計(jì)數(shù)及中性粒細(xì)胞、CRP都升高;抽取患膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)
5、積液,行細(xì)菌培養(yǎng)均有金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)。連續(xù)給藥2周后檢測(cè)血常規(guī),虎苓貼膏組、青霉素組、虎苓貼膏加青霉素組中兔膝血液中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)及CRP低于造模照組,通過(guò)SPSS19.0軟件對(duì)各組間比較,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)束空氣栓塞處死動(dòng)物,解剖左膝關(guān)節(jié),見(jiàn)B、C、D、E、F組膝關(guān)節(jié)增粗,關(guān)節(jié)腔內(nèi)見(jiàn)膿性液及壞死組織,滑膜充血水腫,部分見(jiàn)軟骨缺失,以B組最為明顯,而C、D、E、F組與B組比較軟骨破壞程度輕;光學(xué)顯微鏡下,C、D、E、F組
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