2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:探討川芎嗪(TMP)逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥細(xì)胞BEL-7402/ADM的耐藥作用與ROS-MAPK通路的關(guān)系。
   方法:將人肝癌細(xì)胞BEL-7402和BEL-7402/ADM分為以下10組。即:BEL-7402、 BEL-7402/ADM、 BEL-7402/ADM+TMP、BEL-7402/ADM+VRP、 BEL-7402/ADM+3-AT; BEL-7402+ADM、BEL-7402/ADM+ADM、BEL-7402/

2、ADM+TMP+ADM、BEL-7402/ADM+VRP+ADM、BEL-7402/ADM+3-AT+ADM。以TMP作用于人肝癌多藥耐藥細(xì)胞BEL-7402/ADM,以CCK-8來(lái)測(cè)定每組細(xì)胞經(jīng)多柔比星(ADM)作用后的IC50值、耐藥倍數(shù)及逆轉(zhuǎn)倍數(shù);觀察抑制率及耐藥逆轉(zhuǎn)。并分別聯(lián)合ROS的誘導(dǎo)劑(3-AT)和MAPK抑制劑(ERK抑制劑UO126、JNK抑制劑SP600125、p38抑制劑SB203580),觀察干預(yù)前后逆轉(zhuǎn)差異。激

3、光共聚焦顯微鏡(CLSM)和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)各組細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)ROS的熒光強(qiáng)度;采用流式細(xì)胞儀(FCM)、HPLC技術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)多柔比星蓄積;以流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞的凋亡情況。
   結(jié)果:
   (1) CCK-8測(cè)定結(jié)果顯示,各耐藥組細(xì)胞組的IC50值均高于親本細(xì)胞,這表明與親本細(xì)胞相比各耐藥組細(xì)胞對(duì)ADM產(chǎn)生一定的耐藥性。其中,與對(duì)照組耐藥細(xì)胞BEL-7402/ADM相比,加入TMP后耐藥細(xì)胞的

4、耐藥倍數(shù)降低,逆轉(zhuǎn)倍數(shù)提高,這表明TMP對(duì)耐藥細(xì)胞有逆轉(zhuǎn)作用。對(duì)于耐藥細(xì)胞,TMP分別聯(lián)合ERK抑制劑UO126和JNK抑制劑SP600125后,可降低耐藥細(xì)胞耐藥倍數(shù),升高逆轉(zhuǎn)倍數(shù)而逆轉(zhuǎn)耐藥。且逆轉(zhuǎn)劑TMP聯(lián)合JNK阻斷劑SP600125后,其耐藥倍數(shù)明顯低于耐藥細(xì)胞而逆轉(zhuǎn)耐藥。但是,逆轉(zhuǎn)劑TMP聯(lián)合p38抑制劑SB203580作用于耐藥細(xì)胞后,反而升高了耐藥細(xì)胞的耐藥倍數(shù),使耐藥細(xì)胞對(duì)化療藥物更加不敏感。(2)CLSM和FCM測(cè)定細(xì)

5、胞內(nèi)ROS的熒光強(qiáng)度結(jié)果顯示:與對(duì)照組耐藥細(xì)胞BEL-7402/ADM相比,加入TMP后耐藥細(xì)胞內(nèi)的ROS水平得到了提高,且加入化療藥物ADM后細(xì)胞內(nèi)的ROS水平明顯升高,這說(shuō)明了耐藥細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐藥性與ROS有關(guān)。當(dāng)TMP聯(lián)合化療藥物ADM后,有升高耐藥細(xì)胞內(nèi)的ROS的趨勢(shì)。(3) FCM測(cè)定細(xì)胞內(nèi)多柔比星蓄的積程度結(jié)果顯示:TMP可使化療藥物ADM在細(xì)胞內(nèi)蓄積。(4) HPLC測(cè)定細(xì)胞內(nèi)多柔比星的濃度百分比顯示:在相同劑量ADM

6、的情況下,TMP可提高細(xì)胞內(nèi)ADM的含量,這一結(jié)果與FCM檢測(cè)結(jié)果一致。(5) FCM檢測(cè)Annexin V-FITC雙標(biāo)定后各組細(xì)胞的細(xì)胞凋亡情況表明,加入TMP可使耐藥細(xì)胞對(duì)ADM的敏感性增強(qiáng)而誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞凋亡。
   結(jié)論:肝癌多藥耐藥細(xì)胞內(nèi)的ROS水平比親本細(xì)胞下降;細(xì)胞耐藥和MAPK通路中的ERK、JNK正相關(guān),與p38負(fù)相關(guān),但升高細(xì)胞內(nèi)的ROS可使細(xì)胞恢復(fù)對(duì)化療藥物的敏感而逆轉(zhuǎn)細(xì)胞耐藥。川芎嗪逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥細(xì)胞B

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