雌激素調(diào)節(jié)BK通道表達(dá)及其機(jī)制的研究.pdf

1、大電導(dǎo)鈣依賴性鉀離子通道（BK）廣泛分布在哺乳動(dòng)物的各種組織中并具有重要的生理功能。在腦組織中，BK具有參與胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、調(diào)節(jié)興奮及保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞等作用。雌激素是一類甾類激素，具有廣泛的生理功能，可保護(hù)神經(jīng)，還可作用于離子通道。之前研究發(fā)現(xiàn)，雌激素可以與各組織中不同鉀離子通道如電壓依賴性鉀離子通道（Kv）相互作用。BK與雌激素均參與神經(jīng)保護(hù)，但雌激素是否作用于BK通道而發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用還不清楚。
　　在本研究中，我們用小鼠N2A

2、及人SK-N-SH細(xì)胞來(lái)研究雌激素與BK通道的相互作用。首先，PCR檢測(cè)到N2A細(xì)胞中表達(dá)BK通道α1、β1、β2和β4亞基，而SK-N-SH細(xì)胞表達(dá)α1、β2、β3和β4亞基。運(yùn)用不同濃度的17β雌二醇孵育細(xì)胞24小時(shí)之后，發(fā)現(xiàn)在兩種細(xì)胞中各個(gè)亞基表達(dá)均呈現(xiàn)濃度依賴性升高，例如，10 nM雌激素處理 N2A細(xì)胞后，使α亞基表達(dá)上調(diào)79.3％，而1 nM雌激素使α亞基表達(dá)上調(diào)僅為64.7%。17β雌二醇的作用效果呈現(xiàn)時(shí)間依賴性增強(qiáng)，48

3、小時(shí)的處理較24小時(shí)處理大大提高了N2A細(xì)胞中α和β2亞基和SK-N-SH細(xì)胞中α和β3的表達(dá)。全細(xì)胞電流記錄也證實(shí)上述處理可相應(yīng)提高TEA敏感的BK電流幅值，如應(yīng)用10 nM雌激素可使N2A細(xì)胞中電流的幅值提高了216.75%。將小干擾RNA（siERα和siERβ）轉(zhuǎn)染上述細(xì)胞以各自敲低雌激素受體α（ERα）和β（ERβ），結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染siERβ可顯著降低的雌激素上調(diào)BK亞基的作用，而轉(zhuǎn)染siERα后卻無(wú)顯著作用，這表明17β雌二醇