HPLC柱后衍生化法在伏格列波糖質(zhì)量控制中應(yīng)用的研究.pdf

1、糖尿病是以慢性高血糖為特征的一組異質(zhì)性代謝性疾病,由某種原因造成胰島素絕對(duì)或相對(duì)缺乏所引起,以慢性高血糖伴碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝障礙為特征,糖尿病的患者人數(shù)也隨著人們生活水平的提高而逐年上升。目前處于研究階段的口服糖尿病藥物有口服胰島素制劑、促胰島素分泌劑、胰島素增敏劑、α-葡萄糖苷酶抑制劑等四類。伏格列波糖是一種新型的α-葡萄糖苷酶抑制劑,由日本武田藥品工業(yè)株式會(huì)社開發(fā)研制,并于1994年上市,其商品名為倍欣。與其它α-葡萄糖

2、苷酶抑制劑相比,伏格列波糖具有活性高、劑量小、胃腸道內(nèi)副作用小等優(yōu)點(diǎn)。由于分子中并無共軛結(jié)構(gòu)和生色團(tuán),伏格列波糖無法采用HPLC/UV、HPLC/FLD等分析方法進(jìn)行檢測(cè)。國內(nèi)外研究者曾采用過HPLC/UV、HPLC/ELSD、HPLC/RID、柱前衍生-GC、柱前衍生-HPLC、HPLC柱后衍生熒光分析法等分析法。與其它分析方法相比,HPLC柱后衍生熒光分析法具有選擇性好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),適合用于伏格列波糖及其制劑的質(zhì)量控制中。

3、>　　 本文建立了一種用于伏格列波糖及其制劑質(zhì)量控制的HPLC柱后衍生熒光分析方法,并對(duì)可能影響伏格列波糖峰面積的柱后衍生因素進(jìn)行了考查。本研究主要分為兩個(gè)部分：第一部分豐要是HPLC柱后衍生熒光分析方法的建立及優(yōu)化；第二部分是HPLC柱后衍生因素的考查。主要內(nèi)容如下：⑴采用Zorbax SB-aq4.6*250mm5μm;含不同濃度辛烷磺酸鈉的磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相;熒光檢測(cè)器檢測(cè)(激發(fā)波長(zhǎng)為350nm,發(fā)射波長(zhǎng)430nm,PMT設(shè)為

4、16);?；撬岷透叩馑徕c為衍生試劑:反應(yīng)浴溫度100℃,衍生反應(yīng)管長(zhǎng)20m(內(nèi)徑,0.5mm):冷卻浴溫度15℃,冷卻管長(zhǎng)2m(內(nèi)徑,0.3mm)。⑵采用單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)考查了T形三通接法、反應(yīng)浴溫度、冷卻浴溫度、衍生試劑濃度、伏格列波糖濃度、流動(dòng)相與衍生試劑流速及二者的流速比等柱后衍生因素對(duì)伏格列波糖峰面積的影響,結(jié)論如下：T形三通的接法對(duì)伏格列波糖峰面積影響不大,但對(duì)其理論塔板數(shù)有一定的影響；在一定范圍內(nèi),伏格列波糖峰面積隨著反應(yīng)浴溫