復(fù)合益生菌干預(yù)對高脂高糖誘導(dǎo)肥胖小鼠子代脂代謝影響的研究.pdf

1、目的：探討復(fù)合益生菌干預(yù)對肥胖小鼠及其子代脂代謝的影響。
　　方法：
　　1.將30只C57BL/6J雌性小鼠隨機(jī)分為對照組，肥胖組和菌群干預(yù)組，每組10只，分別給予正常飼料同時(shí)灌胃生理鹽水、高脂高糖飼料同時(shí)灌胃生理鹽水、高脂高糖飼料同時(shí)給予復(fù)合益生菌（雙歧桿菌、干酪乳桿菌、嗜熱鏈球菌及鼠李糖乳桿菌），單純喂養(yǎng)期6周，建立肥胖小鼠模型；將雌、雄鼠合籠受孕，懷孕期約3周，喂食飼料同上；母鼠哺乳期飲食同上，子鼠均母乳喂養(yǎng)，3周后

2、處死母鼠及子鼠。
　　2.每周測量母鼠體重；留取母鼠哺乳期第21天糞便及血液標(biāo)本，進(jìn)行菌群及血脂分析；留存母鼠哺乳期第21天肝臟樣本進(jìn)行HE染色分析。
　　3.測量子鼠出生后第3、7、14、21天體重；留取子鼠第21天糞便及血液樣本，進(jìn)行菌群及血脂分析；留取子鼠第21天肝臟樣本進(jìn)行HE染色分析。
　　4.糞便菌群分析：提取母鼠和子鼠的糞便菌群 DNA，PCR擴(kuò)增后進(jìn)行 DGGE電泳，關(guān)鍵條帶進(jìn)行切膠回收后測序分析。

3、r>　　5.血脂檢測：ELISA法檢測小鼠血清TC（總膽固醇）、TG（甘油三酯）、HDL（高密度脂蛋白）、LDL（低密度脂蛋白），計(jì)算TC/HDL、LDL/HDL比值。
　　結(jié)果：
　　1.復(fù)合益生菌干預(yù)對母鼠體重的影響
　　每周稱量母鼠體重繪制變化曲線，在整個(gè)飼養(yǎng)周期，飼喂高脂高糖飲食的肥胖組小鼠在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，體重明顯高于正常對照組；而菌群干預(yù)組母鼠在各時(shí)間點(diǎn)，體重均小于肥胖組，而更接近正常對照組。
　　2.復(fù)

4、合益生菌干預(yù)對母鼠腸道菌群的影響
　　聚類分析結(jié)果表明，對照組母鼠聚為一類，肥胖組母鼠聚為一類，可以看出肥胖母鼠的腸道菌群與正常母鼠存在明顯的差異；菌群干預(yù)組與對照組母鼠結(jié)果相互混雜，未形成明顯的聚類現(xiàn)象，可以看出復(fù)合益生菌干預(yù)后母鼠的腸道菌群組成與正常母鼠相似。
　　3.復(fù)合益生菌干預(yù)對母鼠血脂的影響
　　肥胖組母鼠與對照組對比，TC和LDL指標(biāo)以及TC/HDL和LDL/HDL比值明顯升高，HDL明顯降低，TG沒有明

5、顯變化；菌群干預(yù)組母鼠TC、LDL、TC/HDL和LDL/HDL比肥胖組明顯降低，HDL明顯升高，TG沒有明顯變化；菌群干預(yù)組母鼠與對照組相比，TC、LDL、TC/HDL和LDL/HDL依然是明顯升高，TG和HDL沒有明顯變化。
　　4.復(fù)合益生菌干預(yù)對母鼠肝臟組織學(xué)的影響
　　經(jīng)過HE染色石蠟切片，顯微鏡下可見肥胖組母鼠肝臟發(fā)生脂肪變性，復(fù)合益生菌干預(yù)后脂肪變性有所緩解。
　　5.子鼠體重曲線
　　肥胖組子鼠在

6、各個(gè)檢測點(diǎn)體重明顯高于正常對照組子鼠；而菌群干預(yù)組子鼠在各個(gè)檢測點(diǎn)體重均小于肥胖組，而更接近正常對照組。
　　6.子鼠糞便菌群DGGE分析
　　聚類分析結(jié)果顯示，肥胖組子鼠聚為一類，對照組和菌群干預(yù)組子鼠聚為一大類，說明肥胖組與對照組子鼠的腸道菌群存在明顯的差異，而菌群干預(yù)組與對照組子鼠的腸道菌群沒有明顯差異。
　　7.子鼠血脂分析
　　肥胖組子鼠與對照組相比TC、HDL、LDL、TC/HDL和LDL/HDL明顯

7、升高，TG沒有明顯變化；菌群干預(yù)組子鼠與肥胖組相比，TC、HDL、LDL、TC/HDL和 LDL/HDL明顯降低；菌群干預(yù)組子鼠與對照組相比，各項(xiàng)結(jié)果均沒有明顯變化。
　　8.子鼠肝臟組織學(xué)變化
　　鏡下觀察發(fā)現(xiàn)肥胖組子鼠肝臟中呈現(xiàn)脂肪樣變性，菌群干預(yù)組子鼠的肝臟形態(tài)更接近對照組。
　　結(jié)論：
　　1.高脂高糖飲食誘導(dǎo)母鼠體重增加，腸道菌群紊亂，血脂代謝異常，肝臟發(fā)生脂肪樣變性。
　　2.高脂高糖飲食同時(shí)加