黃精對染鎘小鼠腎損傷的治療作用研究.pdf

1、近年來，環(huán)境重金屬污染問題，特別是鎘污染問題，已引起人們的廣泛關(guān)注。鎘可以引起人和動(dòng)物血液、心臟、肝臟、腎臟、睪丸等多種組織器官的損傷。然而，目前仍缺乏有效的鎘中毒治療藥物。中醫(yī)認(rèn)為，鎘腎中毒為腎虛血瘀之癥，因此，研究益腎、補(bǔ)氣、活血等中藥，對發(fā)現(xiàn)抗鎘損傷中藥有重要意義。黃精具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰和益腎的功效，尤其對于精血不足和腰膝酸軟等癥具有良好的療效。但是，黃精對鎘腎損傷的治療效果及其作用機(jī)制尚不清楚。本研究從小鼠腎功能指標(biāo)、腎病理組織學(xué)、腎

2、金屬元素代謝水平及分子生物學(xué)水平上，探究黃精對染鎘小鼠腎臟損傷的臨床療效及作用機(jī)理，為黃精抗鎘損傷的臨床應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。
　　本研究從熟地、黃精、當(dāng)歸、山萸肉及肉蓯蓉中篩選出黃精作為最佳的抗鎘損傷藥物。通過測定小鼠血清肌酐、尿素氮和尿酸等指標(biāo)，觀察黃精對染鎘小鼠腎功能的影響;采用病理組織切片法，研究黃精對染鎘小鼠腎臟病理組織學(xué)變化的影響;采用原子吸收分光光度法測定腎臟金屬元素含量，分析黃精對染鎘小鼠腎臟鎘、鋅、銅、鐵、錳等金屬元

3、素代謝的影響;以及實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測黃精對染鎘小鼠腎臟P53、Bcl-xl、Bcl-2、Bax及Caspase3mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果如下:
　　(1)抗鎘腎損傷中藥的篩選模型組小鼠血清肌酐和尿素氮及腎臟鎘含量均顯著增加，血清尿酸水平均顯著降低，與空白組相比差異均顯著（P＜0.05）;與模型組相比，黃精、熟地、當(dāng)歸、山萸肉及肉蓯蓉治療組小鼠血清尿酸含量顯著增加（P＜0.05），黃精、當(dāng)歸和熟地治療組小鼠血清中肌酐和尿素氮含

4、量顯著降低(P＜0.05)，黃精、當(dāng)歸、熟地和肉蓯蓉治療組小鼠腎中鎘的含量顯著降低(P＜0.05)，其中黃精能使染鎘小鼠腎臟鎘含量降低43.48％，當(dāng)歸、熟地和肉蓯蓉分別為34.95％、24.36％和24.74％;模型組小鼠腎小管上皮細(xì)胞多腫脹壞死，細(xì)胞間的間隙變大，腎小球與腎小囊之間的間隙消失;各中藥治療組與模型組相比，細(xì)胞核清晰，細(xì)胞腫脹減少，腎小管之間的間隙較為清楚，部分腎小管管腔清晰可見，腎小球和腎小囊的結(jié)構(gòu)趨于正常。
　

5、　(2)黃精對染鎘小鼠腎功能的影響模型組小鼠血清肌酐和尿素氮含量較空白組顯著增高（P＜0.05），血清尿酸含量較空白組顯著降低(P＜0.05)。不同劑量黃精治療組在治療15d、25d、35d時(shí)，小鼠血清肌酐和尿素氮含量顯著低于模型組(P＜0.05);其中黃精低劑量組血清肌酐和尿素氮水平高于黃精中、高劑量組，黃精高劑量組高于黃精中劑量組;不同劑量黃精治療組均能顯著恢復(fù)染鎘小鼠血清尿酸水平，與模型組相比，差異顯著(P＜0.05);并隨著用藥

6、劑量和用藥時(shí)間的增加，尿酸恢復(fù)更為顯著。
　　(3)黃精對染鎘小鼠腎臟金屬元素含量的影響模型組小鼠腎臟鎘含量顯著高于空白組（P＜0.05），并隨時(shí)間延長染鎘小鼠腎臟鎘含量逐漸增加;模型組小鼠腎臟銅、錳、鐵的含量顯著低于空白組（P＜0.05）。不同劑量黃精治療組在治療15d時(shí)，小鼠腎臟中的鎘含量顯著高于模型組（P＜0.05）;而在25d時(shí)，各劑量組腎臟的鎘含量與模型組相比無顯著差異（P＞0.05）;在治療第35d，各黃精治療組小鼠腎

7、臟中的鎘含量較模型組顯著減少(P＜0.05)，其中黃精中劑量組降低最顯著，能使染鎘小鼠腎臟鎘含量降低54％左右。與模型組相比，不同劑量黃精在治療的15和25d小鼠腎鋅含量沒有顯著影響（P＞0.05）;但在治療35d時(shí)，不同劑量黃精組小鼠腎鋅含量較空白組和模型組顯著增加(P＜0.05)。與模型組相比，在整個(gè)治療周期內(nèi)，不同劑量黃精組小鼠腎臟鐵、銅含量均顯著增加。在治療15d，不同劑量黃精組小鼠腎錳的含量較模型組無顯著差異（P＞0.05），

8、但是在治療25d、35d小鼠腎錳含量較模型組顯著增加。
　　(4)黃精對染鎘小鼠病理組織學(xué)影響模型組小鼠腎小管上皮細(xì)胞多腫脹壞死，細(xì)胞間的間隙變大，腎小球與腎小囊之間的間隙消失。在黃精治療的第15d，低劑量組和中劑量組腎小管腔并不明顯，腎小管略顯腫脹。而高劑量組黃精的腎小管腔清晰可見;在治療25d及以后，各黃精治療組腎小管管腔均清晰可見。各組在治療后，隨著治療時(shí)間的延長，腎小球結(jié)構(gòu)趨于正常。
　　(5)黃精對染鎘小鼠腎臟基因

9、表達(dá)影響模型組小鼠腎臟的抗凋亡基因Bcl-2、Bcl-xl mRNA表達(dá)水平顯著下調(diào)，促凋亡基因P53、Bax和Caspase3mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)，與空白組相比差異顯著（P＜0.05）。在使用黃精治療后，各黃精劑量組小鼠腎臟抗凋亡基因Bcl-2、Bcl-xl mRNA的表達(dá)顯著上調(diào)，促凋亡基因P53、Bax和Caspase3mRNA表達(dá)顯著下調(diào)，與模型組相比差異顯著（P＜0.05），其中以黃精中劑量組對P53-Bcl-2-Casp