小鼠腦能量代謝的低溫固定方法研究及初步應用.pdf

1、腦能量代謝信息的觀測在腦疾病病理和腦功能機理的揭示上發(fā)揮著重要的作用。低溫光學顯微成像技術利用低溫的優(yōu)勢可同時獲取樣本的結構和代謝信息，并且沒有成像深度的限制，能獲取大尺寸樣本的三維分布信息，是腦能量代謝信息的一種重要觀測手段。然而，低溫光學顯微成像技術能否準確表征組織、器官能量代謝狀態(tài)，主要取決于能量代謝的低溫固定方法。現有的有效低溫固定方法是基于大鼠模型建立的，對于應用更為廣泛的模型動物小鼠，尚未有適用的固定方法。這主要受限于小鼠生

2、理狀態(tài)難以控制、易受溫度影響，且耐操作性差。針對這一問題，本文建立了一種適用于小鼠腦能量代謝狀態(tài)的低溫固定方法，并展示了這一固定方法在鼠腦氧供應調控和皮層擴散性抑制中的初步應用。
　　本文在分析已有的生物組織低溫固定技術的基礎上，選擇了適用于大鼠的改良漸進式固定方法。根據小鼠腦的生理特征，分析了對鼠腦代謝狀態(tài)產生影響的多個因素，并進行了實驗條件的優(yōu)化對比研究，建立了一種適合于小鼠腦代謝狀態(tài)低溫固定的方法。
　　在此基礎上，通

3、過鼠腦氧供應調控實驗與皮層擴散性抑制（Cortical spreading depression,CSD）實驗，進一步驗證了本文建立的小鼠腦固定方法的有效性及應用價值。展示了缺氧、常氧和高氧三種氧濃度供應時的鼠腦全腦代謝狀態(tài)，證明了本文提出的固定方法的有效性。該結果不僅驗證了能量代謝與氧供應的相關性，還發(fā)現胼胝體區(qū)域和海馬區(qū)域的代謝狀態(tài)在缺氧和高氧條件下不一致的響應模式。此外，本文還展示了CSD狀態(tài)下小鼠全腦代謝狀態(tài)，發(fā)現CSD響應區(qū)域