高溫環(huán)境下失血性休克大鼠病理生理特點及防治措施研究.pdf

1、失血性休克是由大量失血引起的臨床重癥，其特點表現(xiàn)為機體有效循環(huán)血量不足、組織灌流不足從而導致多器官功能障礙甚至死亡。平時和戰(zhàn)時失血性休克的發(fā)生率及死亡率很高。目前對于失血性休克的研究重點關注在常溫條件下失血性休克的發(fā)生機制以及針對性防治措施。對高溫環(huán)境下失血性休克的病理生理特點目前研究較少，相關損傷機制目前尚不清楚。
　　隨著全球氣候變暖，高溫地區(qū)逐漸增多，以往大量研究證實，高溫可致機體內環(huán)境紊亂、組織器官損傷、細胞結構破壞等。關

2、于高溫環(huán)境的損傷機制及治療以往也有較多研究。但是，在高溫環(huán)境下，發(fā)生失血性休克后其病理生理特點及治療方案目前尚不清楚。
　　目的:
　　據(jù)此，本研究使用高溫失血休克模型，觀察高溫環(huán)境下失血休克后大鼠內環(huán)境、組織器官功能、應激炎性因子、線粒體功能及結構變化，以及針對性防治措施的研究。主要內容包括:(1)不同環(huán)境溫度下，大鼠核心溫度的變化;(2)高溫環(huán)境下，大鼠失血性休克后存活時間的變化;(3)高溫環(huán)境下，失血性休克大鼠的病理生

3、理特點（器官功能、應激因素、炎性因子以及心肌線粒體結構和功能）;(4)高溫環(huán)境下，失血性休克大鼠的治療方案。
　　方法:
　　將SD大鼠置于高溫環(huán)境中12小時，采用股動脈插管放血方式，建立高溫環(huán)境下失血性休克模型，觀察高溫環(huán)境下大鼠休克前、放血末、放血后1h機體內環(huán)境[電解質(Na+、K+)、滲透壓，動脈血氣，血液流變學]、器官功能（心臟、肝臟、腎臟）、應激因子[促腎上腺皮質激素(ACTH)、糖皮質激素(GCS)]、炎性因子

4、[白介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子α(TNF-α)]以及線粒體功能[氧化損傷指標(ROS、MDA)、ATP含量、ATP酶活性]等指標的變化。
　　內容:
　　第一部分 不同溫度環(huán)境下，大鼠核心溫度的變化
　　將大鼠置于不同溫度(38℃、36℃、34℃、25℃)的環(huán)境中，采用體溫計每隔0.5小時檢測一次大鼠的肛溫，持續(xù)觀察12小時，記錄大鼠的核心溫度變化。
　　第二部分 高溫環(huán)境下，失血性休克大鼠存活時間的變化<

5、br>　　1.大鼠放置于不同環(huán)境溫度(25℃、32℃、34℃、36℃、38℃)環(huán)境中12小時后，按全身血量40％放血，建立失血性休克模型，觀大鼠72小時的生存時間及生存率的變化。
　　2.大鼠放置于常溫環(huán)境(25℃)和高溫環(huán)境(34℃)12小時后，觀察不同失血量（分別按全身血量的30％、40％、50％），大鼠72小時生存時間和生存率的變化。
　　第三部分 高溫環(huán)境下，失血性休克大鼠的病理生理特點
　　1.大鼠放置于常溫

6、環(huán)境(25℃)和高溫環(huán)境(34℃)12小時后，按全身血量40％放血，建立失血性休克模型。觀察休克前、放血末、放血后1小時大鼠的電解質(Na+、K+)、滲透壓、動脈血氣、血液流變學指標的變化。
　　2.大鼠放置于常溫環(huán)境(25℃)和高溫環(huán)境(34℃)12小時后，按全身血量40％放血，建立失血性休克模型。觀察休克前、放血末、放血后1小時大鼠的心功能[心輸出量(CO)、心臟指數(shù)(CI)、每搏指數(shù)(SI)]、肝功能[谷草轉氨酶(AST)、

7、谷丙轉氨酶(ALT)]、腎功能[肌酐(CREA)]的變化，探究高溫環(huán)境下失血性休克對大鼠器官功能的影響。
　　3.大鼠放置于常溫環(huán)境(25℃)和高溫環(huán)境(34℃)12小時后，按全身血量40％放血，建立失血性休克模型。觀察休克前、放血末、放血后1小時大鼠體內應激因子(ACTH、GCS)和炎性因子（IL-6、TNF-α）水平的變化。
　　4.大鼠放置于常溫環(huán)境(25℃)和高溫環(huán)境(34℃)12小時后，按全身血量40％放血，建立失

8、血性休克模型。觀察休克前、放血末、放血后1小時大鼠心肌線粒體功能[心肌氧化損傷程度(ROS、MDA)、ATP酶活性、ATP含量]以及心肌線粒體結構的變化。
　　第四部分 高溫環(huán)境失血休克后的治療方案
　　1.大鼠放置于高溫環(huán)境(34℃)12小時后，按全身血量40％放血，建立失血性休克模型。給予不同溫度乳酸林格氏液(LR)(37℃、25℃、10℃、4℃)，按2倍失血量進行復蘇，觀察休克大鼠72小時生存時間和生存率變化。

9、　　2.大鼠放置于高溫環(huán)境(34℃)12小時后，按全身血量40％放血，建立失血性休克模型。給予4℃乳酸林格氏液(LR)聯(lián)合線粒體分裂抑制劑Mdivi-1(1mg/kg)復蘇，觀察大鼠72小時生存時間及生存率的變化。
　　結果:
　　第一部分 不同溫度的環(huán)境下，大鼠核心溫度的變化
　　在高溫環(huán)境中，30分鐘后大鼠核心體溫迅速升高。在38℃環(huán)境中3小時后大鼠達到最高(40.6℃)，隨后在39.8℃至40.6℃之間波動;在3

10、6℃環(huán)境中30分鐘后大鼠最高核心溫度達到最高(40.0℃)，隨后在39.4℃至40.0℃之間波動。在34℃環(huán)境中2小時后大鼠達到最高核心溫度(39.4℃)，隨后逐漸下降，6小時后大鼠核心體溫與常溫組(25℃)核心體溫無差異，均在38.4℃至38.8℃之間。
　　第二部分 高溫環(huán)境下，大鼠失血性休克后存活時間的變化
　　1.大鼠在不同環(huán)境溫度下(25℃、32℃、34℃、36℃、38℃)放置12小時，40％失血后，隨著環(huán)境溫度的

11、增加，失血性休克大鼠72小時生存率逐漸減低。
　　2.在不同失血量（全身血量的30％、40％、50％）的情況下，與常溫組相比(25℃)，高溫組(34℃)失血性休克后大鼠死亡明顯加快。在高溫環(huán)境下(34℃)，失血量越大，72小時生存率越低。結果說明高溫環(huán)境會加重失血休克的死亡。
　　第三部分 高溫環(huán)境下，失血性休克大鼠的病理生理特點
　　1.電解質、滲透壓:與常溫組(25℃)相比，高溫組(34℃)大鼠電解質及滲透壓有部分

12、變化。休克前，高溫組(34℃)大鼠Na+濃度、血漿滲透壓升高(P＜0.05);休克后，高溫組大鼠Na+、K+濃度進一步升高(P＜0.05)，血漿滲透壓無明顯變化;
　　動脈血氣:與常溫組(25℃)相比，高溫組(34℃)大鼠動脈血氣中動脈氧分壓(PO2)、二氧化碳分壓(PCO2)變化明顯。表現(xiàn)為休克前，高溫組大鼠PO2、PCO2明顯減低(P＜0.01);休克后，PCO2、HCO3-降低(P＜0.05);
　　血液流變學指標:與

13、常溫組(25℃)相比，高溫組(34℃)大鼠在休克前變化明顯。休克前，高溫組(34℃)大鼠全血粘度切變率減低(P＜0.01);失血性休克后，兩組全血粘度切變率無差異。
　　2.心功能:與常溫組(25℃)相比，高溫組(34℃)大鼠心功能在休克前代償性升高，失血性休克后高溫組大鼠心功能受損明顯。表現(xiàn)為與常溫組相比，高溫組(34℃)大鼠休克前心輸出量(CO)、心臟指數(shù)(CI)分別升高25.1％(P＜0.05)、31.3％(P＜0.05);

14、失血性休克后，高溫組大鼠CO、CI分別降低了63％、63％，常溫組大鼠CO、CI分別降低44％、48％。
　　肝腎功能:與常溫組(25℃)相比，高溫組(34℃)大鼠肝腎功能在休克前無明顯變化，失血性休克后受損加重。表現(xiàn)為失血性休克后高溫組大鼠AST、ALT比常溫組分別增高24.7％(P＜0.05)、44.1％(P＜0.05)，CREA升高幅度為50.7％，顯著高于常溫組(P＜0.01)。
　　3.應激因子:與常溫組(25℃)

15、相比，高溫組(34℃)大鼠休克前機體處于高應激狀態(tài)，失血性休克后，應激因子水平升高更加明顯。表現(xiàn)為休克前高溫組大鼠的ACTH、GCS分別升高43.4％(P＜0.05)、114.5％(P＜0.01)。失血性休克后，高溫組大鼠ACTH、GCS水平均明顯高于常溫組，分別升高121.9％(P＜0.01)、81.8％(P＜0.01)。
　　炎性因子:與常溫組(25℃)相比，高溫組(34℃)大鼠休克前炎性因子已明顯升高，失血性休克后升高更加明

16、顯。表現(xiàn)為休克前高溫組大鼠的IL-6、TNF-α分別升高15.6％(P＜0.05)、16.6％(P＜0.01)。失血性休克后，高溫組大鼠IL-6、TNF-α水平均明顯高于常溫組，分別升高13.2％(P＜0.05)、13.9％(P＜0.01)。
　　4.線粒體功能:與常溫組相比，高溫組大鼠休克前線粒體功能已經受到損傷，失血性休克后損傷更加嚴重。休克前，高溫組大鼠比常溫組大鼠ATP含量低41.7％(P＜0.05)，ROS、MDA無明顯

17、變化。失血性休克后，ATP含量降低43.0％（P＜0.05），與常溫組相比高溫組大鼠ROS、MDA分別升高23.5％（P＜0.05）、61.5％(P＜0.05)。
　　線粒體結構:電鏡觀察休克前高溫組大鼠心肌線粒體發(fā)現(xiàn)形態(tài)結構已呈現(xiàn)紊亂。失血性休克后，高溫組大鼠線粒體嵴結構發(fā)生溶解、斷裂，出現(xiàn)空泡，并可見肌絲的溶解，線粒體損傷程度重于常溫組。
　　第四部分 高溫環(huán)境失血性休克大鼠的治療方案
　　1.給予不同溫度LR液體

18、復蘇后，均可延長大鼠的生存時間及生存率，其中4℃LR效果最好，與常溫液體(25℃)復蘇相比，生存率提高71.4％。
　　2.在4℃LR中聯(lián)合線粒體分裂抑制劑Mdivi-1(1mg/kg)后，與單純液體復蘇相比，聯(lián)合線粒體抑制劑可以使大鼠的生存時間進一步延長，生存率進一步提高。
　　結論:
　　1.高溫環(huán)境加重失血性休克大鼠死亡，環(huán)境溫度越高死亡越快。
　　2.高溫環(huán)境導致失血性休克快速死亡的原因可能與高溫造成機體