miR-206對膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞Cx43磷酸化表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：
　　探討微小RNA206(miR-206)對人膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251細(xì)胞縫隙連接蛋白43(P-Cx43)磷酸化表達(dá)水平的影響。
　　方法：
　　將U251細(xì)胞接種到6孔培養(yǎng)板，同步化處理后進(jìn)行轉(zhuǎn)染，本次實驗分為空白對照組、陰性對照組、miR-206高表達(dá)組及miR-206低表達(dá)組四組；陰性對照組、miR-206高表達(dá)組及miR-206低表達(dá)組分別轉(zhuǎn)入無意義序列質(zhì)粒、miR-206質(zhì)粒、miR-206-inhibit

2、ion質(zhì)粒,空白對照組不進(jìn)行任何相關(guān)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染。于終止轉(zhuǎn)染48h后,在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率,采用Western blotting法檢測不同組別U251細(xì)胞體內(nèi)縫隙連接蛋白43磷酸化表達(dá)水平的改變。
　　結(jié)果：
　　轉(zhuǎn)染終止48h后,熒光顯微鏡下觀察不同實驗組，轉(zhuǎn)染效率均大于80％。miR-206高表達(dá)組Cx43磷酸化表達(dá)水平明顯升高，與空白對照組、陰性對照組比較差異均具有有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），miR-206低表達(dá)

3、組Cx43磷酸化表達(dá)水平明顯降低，與空白對照組、陰性對照組相比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），空白對照組與陰性對照組相比較Cx43磷酸化表達(dá)水平不具有明顯變化,差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　通過化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑lip2000可以成功將空白質(zhì)粒、miR-206高表達(dá)質(zhì)粒和miR-206低表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進(jìn)入人神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞體內(nèi)，建立實驗所需模型。miR-206可提高U251細(xì)胞內(nèi)縫隙連接蛋白4