基于“炎--癌鏈”探討健脾清熱活血法對慢性萎縮性胃炎的干預(yù)機制研究.pdf

1、目的:
　　(1)臨床試驗部分
　　通過比較慢性萎縮性胃炎患者治療前后的病理分型變化及生存質(zhì)量變化，以明確健脾清熱活血法中藥胃萎清顆粒對CAG患者的臨床療效。
　　(2)動物實驗部分
　　通過運用健脾清熱活血法使用代表方藥(胃萎清)對CAG大鼠進行干預(yù)研究，探討健脾清熱活血法治療萎縮性胃炎的作用機制。通過對慢性萎縮性胃炎模型大鼠的整體情況、胃黏膜病理形態(tài)學(xué)變化、胃黏膜的TNF-α、IKK和p50等相關(guān)指標的觀察，

2、探討胃黏膜萎縮-癌變過程與炎癥信號通路的關(guān)系，為研究中醫(yī)藥的療效機制提供理論基礎(chǔ)。
　　方法:
　　(1)臨床試驗部分
　　經(jīng)過多中心研究，本臨床試驗共搜集78例患者，隨機分為胃萎清組42例，葉酸組36例。其中2例胃萎清組患者脫落，總共76例患者參與數(shù)據(jù)分析。葉酸有4例患者拒絕復(fù)查胃鏡，故未納入病理療效比較。治療前后評價患者病理組織學(xué)檢查、胃鏡下表現(xiàn)及脾胃系疾病之慢性胃炎患者報告結(jié)局量表，從而評估患者的鏡下表現(xiàn)及生存質(zhì)

3、量情況。
　　(2)動物實驗部分
　　本研究購入94只SPF級SD健康雄性大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機分為空白對照組和CAG模型組。其中空白對照組14只，CAG模型組80只。該實驗空白對照組給予正常飲食、自由飲水，直至整個實驗結(jié)束。CAG模型組則予濃度為180μg/mL的MNNG飲用液自由飲用，并在此基礎(chǔ)上采用經(jīng)典的饑飽失常法復(fù)制脾虛證(即喂食1天，禁食1天，如此循環(huán))，連續(xù)造模至第14周，隨機抽取模型組中的兩只CAG大鼠，

4、進行胃黏膜病理形態(tài)組織學(xué)檢查，結(jié)果顯示兩只大鼠胃粘膜病理組織學(xué)均為胃黏膜固有腺體萎縮伴腸上皮化生。確定造模成功后開始給藥，將CAG模型組隨機分為5組:模型組，冒萎清高劑量組，胃萎清中劑量組，胃萎清低劑量組及葉酸組。其中模型組14只，胃萎清高劑量組、中劑量組、低劑量組及葉酸組均分別為16只，正常對照組和模型對照組給予等量生理鹽水。第15周開始灌胃，胃萎清高、中、低劑量組給藥濃度(生藥量)分別為15.6g/kg、7.8g/kg、3.9g/k

5、g。葉酸組第15周開始按1.46mg/kg/d給予葉酸灌胃。灌胃容積為10ml/kg，每日1次，連續(xù)灌胃10周。實驗過程中，每2周給各組大鼠測量一次體重，以觀察體重變化情況。選用電鏡、Real-time PCR及Western blot等方法檢測各組大鼠胃黏膜病理變化及NF-κB炎癥信號通路中的TNF-α、IKK、p50等指標變化情況。
　　結(jié)果:
　　(1)臨床試驗部分
　　兩組患者在年齡、性別、文化程度等基線方面的

6、比較，無明顯差異性，兩組患者的基線一致，可進行治療前后統(tǒng)計比較分析。
　　病理分型變化方面。入組前病理分型方面，入組前兩組患者全部均存在萎縮及慢性炎癥情況;腸化方面，兩組經(jīng)卡方檢驗，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義;異型增生方面，兩組經(jīng)卡方檢驗，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義;活動性方面，由于部分參數(shù)數(shù)值較小，采用Fisher's確切概率法，雙側(cè)檢驗P＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。因此可認為治療前，兩組基線一致，病理分型具有可比性。

7、
　　兩組患者經(jīng)治療后，病理分型前后比較。萎縮方面，胃萎清組及葉酸組治療后改善率分別為65％及62.50％，兩組均可有效改善患者胃黏膜的萎縮，兩組改善萎縮方面療效，經(jīng)卡方檢驗，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。腸化方面，胃萎清組及葉酸組治療后改善率分別為36.67％及31.82％，兩組對胃黏膜的腸化方面有一定程度的改善。異型增生方面，兩組治療前與治療后異型增生的例數(shù)無變化，提示治療組與對照組對胃黏膜異型增生無明顯改善作用。慢性炎癥方

8、面，胃萎清組及葉酸組治療后改善率分別為25％及18.75％，胃萎清組對胃黏膜的慢性炎癥方面有一定的改善。兩組相互比較，由于部分參數(shù)數(shù)值較小，采用Fisher's確切概率法，雙側(cè)檢驗P＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。活動性方面，胃萎清組及葉酸組治療后例數(shù)分別為10例及8例，治療前后比較提示胃萎清組及葉酸組對胃黏膜的活動性方面均無明顯改善。因此，可認為胃萎清及葉酸均可改善胃黏膜的萎縮情況，而對腸化方面有一定的改善效果，而對異型增生、慢性炎癥及

9、活動性方面無明顯改善作用。
　　胃萎清組及葉酸組患者治療前生存質(zhì)量得分比較，無明顯差異，具有可比性。兩組治療后生存質(zhì)量得分比較，提示兩組比較有統(tǒng)計學(xué)意義，經(jīng)胃萎清組治療后患者的生存質(zhì)量優(yōu)于葉酸組治療后患者。其主要改善方面體現(xiàn)在精神形色、消化功能等方面。
　　經(jīng)統(tǒng)計分析后，在生存質(zhì)量方面，胃萎清組患者治療前后生存質(zhì)量對比，有統(tǒng)計學(xué)意義，提示胃萎清組患者治療后生存質(zhì)量較治療前好。除了量表總得分方面，改善的領(lǐng)域及方面包括:生理領(lǐng)域

10、各個方面、獨立性領(lǐng)域以及心理領(lǐng)域方面。提示胃萎清在改善患者的精神狀態(tài)方面、消化功能方面有較好的療效。具體體現(xiàn)在疲倦感的緩解、精神面色的改善、消化功能的好轉(zhuǎn)(噯氣、胃脘脹悶、胃脘痛等癥狀的改善)等，而對患者獨立性方面、心理方面以及社會領(lǐng)域方面的改善不明顯。
　　葉酸組患者治療前后生存質(zhì)量總得分對比，無明顯差異，提示葉酸組患者治療后生存質(zhì)量無明顯改善。在生理領(lǐng)域的消化功能方面，葉酸組患者治療前后得分比較，提示葉酸在改善患者消化功能方面

11、有一定的療效。治療前、后量表余各領(lǐng)域及方面的生存質(zhì)量得分進行比較，均無明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(2)動物實驗部分
　　根據(jù)病理檢查，病理組織學(xué)顯示MNNG合饑飽失常萎縮性胃炎造模法于實驗第14周時造模成功。將成功造模的大鼠隨機分為五組，其中模型組14只，胃萎清高劑量組、胃萎清中劑量組、胃萎清低劑量組及葉酸組分別為16只。一般情況方面，造模組大鼠體重明顯輕于空白組，兩組比較有顯著差異;造模組大鼠造模階段的體重增長值也明顯

12、低于空白組，兩組比較有顯著差異。病理形態(tài)學(xué)方面，胃萎清能一定程度上改善CAG大鼠的胃黏膜病理情況，延緩萎縮性胃炎時所伴有的腸上皮化生或異型增生等的發(fā)展;胃萎清能改善慢性萎縮性胃炎大鼠的胃粘膜大體狀況，通過改善胃粘膜腺上皮主細胞及壁細胞的超微結(jié)構(gòu)，從而影響其胃酸及胃蛋白酶的分泌，起到一定的治療作用。蛋白表達方面，胃萎清能使TNF-α、IKK的表達降低，胃萎清高劑量組能使p50的表達下調(diào)，從而起到控制CAG的發(fā)展。
　　結(jié)論:

13、　　臨床試驗表明，胃萎清可以改善患者胃黏膜病理組織學(xué)。從觀察病例分析判斷，該方可在一定程度上改善胃黏膜萎縮、腸化生等的作用。通過與代表西藥葉酸組的對比，胃萎清能夠明顯改善患者的臨床癥狀及生存質(zhì)量。
　　健脾清熱活血法代表方胃萎清可有效改善CAG大鼠的整體情況，改善大鼠胃黏膜的病理組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)，其作用機制可能為:通過抑制NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的致炎因子，使其蛋白低表達，從而阻斷細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的異常激活，從而達到防治CAG的目的