谷胱甘肽對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)性能和抗氧化功能的影響.pdf

1、本論文研究了飼料中添加谷胱甘肽對(duì)黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）幼魚生長(zhǎng)性能、體成分、血清生化指標(biāo)、免疫抗氧化性能、血細(xì)胞凋亡、抗氨氮應(yīng)激能力及生長(zhǎng)抗氧化凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響。本論文主要包括以下五個(gè)方面的內(nèi)容:
　　1.飼料中添加谷胱甘肽對(duì)黃顙魚幼魚生長(zhǎng)性能、體成分、血清生化指標(biāo)的影響
　　選用初始體重為（1.32±0.01）g的黃顙魚800尾，隨機(jī)分為5組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40尾魚，分別投喂

2、基礎(chǔ)飼料和添加100、300、500、700mg/kg還原型谷胱甘肽的試驗(yàn)飼料，飼養(yǎng)56d后，采樣分析。結(jié)果顯示，隨著飼料中谷胱甘肽添加量的增加，黃顙魚的增重、特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)，均在添加量為300mg/kg時(shí)達(dá)到最大值，且100～500mg/kg組均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);各組之間的飼料系數(shù)、肥滿度和肝體比差異不顯著(P＞0.05)。與對(duì)照組相比，300～700mg/kg組全魚粗蛋白質(zhì)和100～700

3、mg/kg全魚粗脂肪含量顯著升高(P＜0.05)。飼料中添加谷胱甘肽對(duì)黃顙魚血清總蛋白、膽固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿素氮水平和谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均無(wú)顯著影響(P＞0.05)。綜上所述，飼料中添加谷胱甘肽可以提高黃顙魚幼魚的生長(zhǎng)性能、全魚粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量。利用二次回歸方程擬合特定生長(zhǎng)率和谷胱甘肽添加水平，得出谷胱甘肽在黃顙魚幼魚飼料中的適宜添加量為357.69mg/kg。
　　2.飼料中添加谷胱甘肽對(duì)黃顙魚幼魚免疫、抗氧

4、化性能的影響
　　上述飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，采集肝臟和血清檢測(cè)免疫、抗氧化相關(guān)指標(biāo)及谷胱甘肽含量。結(jié)果顯示，除100mg/kg組外，飼料中添加GSH顯著提高黃顙魚肝臟、血清GSH含量(P＜0.05)，當(dāng)GSH添加量≥300mg/kg時(shí)，肝臟和血清GSH含量均呈現(xiàn)穩(wěn)定狀態(tài)。隨著飼料中谷胱甘肽水平的增加，血清免疫和肝臟抗氧化指標(biāo)均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，其中300mg/kg和500mg/kg組溶菌酶與堿性磷酸酶活性、300mg/kg組免疫球

5、蛋白M與補(bǔ)體4含量、500mg/kg組酸性磷酸酶活性與對(duì)照組相比顯著升高(P＜0.05)。與對(duì)照組和700mg/kg組相比，300mg/kg組肝臟超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化酶活性和總抗氧化能力與血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化酶活性均顯著高升高(P＜0.05)。由此可見，飼料中添加谷胱甘肽能提高黃顙魚幼魚免疫及抗氧化性能，其中以300-500mg/kg為宜。
　　3.飼料中添加谷胱甘肽對(duì)黃顙魚幼魚血細(xì)胞凋亡的影響

6、
　　上述飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，采集黃顙魚血細(xì)胞進(jìn)行凋亡相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)。結(jié)果顯示，隨著飼料中谷胱甘肽添加水平的增加，黃顙魚血細(xì)胞活性氧濃度和凋亡率呈先降低后升高的趨勢(shì)，其中100～500mg/kg組活性氧濃度和凋亡率均顯著低于對(duì)照組和700mg/kg組(P＜0.05)，且均在300mg/kg組最低。100mg/kg和300mg/kg組血細(xì)胞鈣離子濃度呈現(xiàn)穩(wěn)定狀態(tài)，但從500mg/kg組開始升高，且500mg/kg和700mg/kg組均顯

7、著高于100～300mg/kg組(P＜0.05)。結(jié)果表明，飼料中添加適量的谷胱甘肽可以降低黃顙魚幼魚血細(xì)胞活性氧濃度，并能使血細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度維持在一定的水平，能抑制血細(xì)胞的凋亡，但高劑量的谷胱甘肽會(huì)使胞漿內(nèi)的鈣離子濃度顯著升高，引發(fā)細(xì)胞程序性凋亡。
　　4.飼料中添加谷胱甘肽對(duì)黃顙魚幼魚抗氨氮應(yīng)激能力的影響
　　上述飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取20尾魚，用氯化銨作為應(yīng)激源進(jìn)行應(yīng)激試驗(yàn)。分別在應(yīng)激72h和96h統(tǒng)計(jì)累

8、計(jì)死亡率，并在96h時(shí)采集血清和肝臟，檢測(cè)相關(guān)應(yīng)激和抗氧化指標(biāo)。結(jié)果顯示，應(yīng)激72h和96h時(shí)，各添加組的累積死亡率均低于對(duì)照組，且隨著添加量的增加累積死亡率呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢(shì)，并均在300mg/kg組達(dá)到最低，其中96h時(shí)，100mg/kg和300mg/kg組均分別顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。添加組黃顙魚死亡時(shí)間較對(duì)照組延遲，96h時(shí)，各添加組黃顙魚累積死亡率均低于對(duì)照組，其中100mg/kg和300mg/kg組顯著降低(P＜

9、0.05)。應(yīng)激96h時(shí)，血清皮質(zhì)醇、尿素氮和血氨隨谷胱甘肽劑量的增加呈先降低后升高的趨勢(shì)，且各試驗(yàn)組的血清皮質(zhì)醇濃度均低于對(duì)照組，其中100mg/kg組和300mg/kg組達(dá)到顯著水平(P＜0.05)。300mg/kg組血清丙二醛含量顯著降低(P＜0.05)。氨氮應(yīng)激96h時(shí)，與對(duì)照組相比，300mg/kg組肝臟和血清超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化酶活性均顯著升高(P＜0.05)，且300mg/kg組血清丙二醛含量顯著降低

10、(P＜0.05)。綜上所述，飼料中添加適量的谷胱甘肽能降低黃顙魚幼魚氨氮應(yīng)激累計(jì)死亡率，降低皮質(zhì)醇濃度，提高抗氧化酶活性。
　　5.飼料中添加谷胱甘肽對(duì)黃顙魚幼魚生長(zhǎng)、抗氧化及凋亡相關(guān)基因mRNA表達(dá)量的影響
　　上述飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，采集肝臟進(jìn)行熒光定量分析。結(jié)果顯示，隨著谷胱甘肽量的增加，黃顙魚肝臟類胰島激素生長(zhǎng)因子1、B淋巴細(xì)胞瘤2基因、熱休克蛋白70、雷帕霉素靶蛋白mRNA的表達(dá)量呈先升高后降低的趨勢(shì)，谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶

11、和B淋巴細(xì)胞瘤x相關(guān)基因mRNA的表達(dá)變化規(guī)律剛好相反;其中，與對(duì)照組相比，300mg/kg組和500mg/kg組類胰島激素生長(zhǎng)因子1、100～500mg/kg組B淋巴細(xì)胞瘤2基因、各添加組熱休克蛋白70mRNA表達(dá)量顯著升高（P＜0.05），300mg/kg組B淋巴細(xì)胞瘤x相關(guān)基因mRNA表達(dá)量顯著降低(P＜0.05);各組間谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶和雷帕霉素靶蛋白mRNA表達(dá)量無(wú)顯著差異(P＞0.05)。由此可見，飼料中添加適量谷胱甘肽能上