基于“祛瘀生新”理論初步探討活血化瘀法與補(bǔ)血法對(duì)骨髓抑制小鼠造血恢復(fù)協(xié)同增效作用機(jī)理.pdf

1、目的：骨髓抑制是臨床上化療后常見(jiàn)的不良反應(yīng)，可引起骨髓造血微環(huán)境、造血干/祖細(xì)胞、造血基質(zhì)細(xì)胞等的損傷?；熀蠊撬枰种频闹饕Y狀如頭痛頭暈、疲乏無(wú)力、腰膝酸軟、惡心嘔吐、食欲不振、眠差、夢(mèng)多易醒、出血及低熱等，可歸屬于中醫(yī)“血虛”、“虛勞”等病證范疇，越來(lái)越多研究表明氣血虧虛可以導(dǎo)致血瘀，血瘀又進(jìn)一步加重氣血損傷。中醫(yī)藥對(duì)治療骨髓抑制有著獨(dú)特自身優(yōu)勢(shì)，如中醫(yī)藥的整體調(diào)理作用、提高機(jī)體適應(yīng)性等作用，在骨髓抑制不良反應(yīng)中有很好的作用。本實(shí)驗(yàn)

2、根據(jù)中醫(yī)“瘀血不去、新血不生”的理論，選用四物湯加大黃蟄蟲(chóng)丸研究“祛瘀生新”對(duì)促進(jìn)化療所致骨髓抑制血虛小鼠造血恢復(fù)的作用及其機(jī)理，以豐富中醫(yī)祛瘀生新理論的科學(xué)內(nèi)涵。
　　方法：采用腹腔注射環(huán)磷酰胺建立骨髓抑制貧血小鼠動(dòng)物模型，通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)、病理切片、流式細(xì)胞術(shù)、分光分析法等細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，觀察基于祛瘀生新中藥復(fù)方對(duì)化療所致骨髓抑制小鼠骨髓組織形態(tài)學(xué)、骨髓細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡情況、骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、

3、脾臟抗氧化作用等的影響，初步探討“祛瘀生新”促進(jìn)化療所致骨髓抑制小鼠造血恢復(fù)的作用及機(jī)制。
　　結(jié)果：（1）四物湯、大黃蟄蟲(chóng)丸均能不同程度拮抗化療后所致小鼠骨髓抑制，增加外周血紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、血紅蛋白、骨髓有核細(xì)胞數(shù)，其中低高劑量合方組、四物湯組對(duì)上述指標(biāo)有顯著性差異，尤以低劑量合方組效果最為顯著，四物湯組次之，而低高劑量大黃蟄蟲(chóng)丸組僅有增高趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　（2）四物湯和低高劑量合方組均能明顯促進(jìn)骨髓抑制小

4、鼠骨髓細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期，使G1期細(xì)胞比例減少，S期和G2/M期細(xì)胞比例增加，從而增加骨髓細(xì)胞的增殖指數(shù)（PI），并同時(shí)減少骨髓細(xì)胞凋亡，其中以低劑量合方組的作用最強(qiáng)，四物湯次之。而低高劑量大黃蟄蟲(chóng)丸組僅表現(xiàn)出趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　（3）四物湯和低高劑量合方組能明顯促進(jìn)骨髓抑制小鼠骨髓成纖維細(xì)胞集落形成，并以低劑量合方組的作用最強(qiáng)，四物湯組次之。低高劑量大黃蟄蟲(chóng)丸組均無(wú)明顯的刺激作用。
　?。?）四物湯和低高劑量合方組均能

5、拮抗環(huán)磷酰胺所致骨髓抑制小鼠脾臟氧化損傷，能顯著增加SOD的活性，降低MDA的含量，其中以低劑量合方組效果最好，四物湯次之。低高劑量大黃蟄蟲(chóng)丸組則效果并不明顯，僅表現(xiàn)出SOD活性升高和MDA含量降低的趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：四物湯、大黃蟄蟲(chóng)丸均能不同程度加快化療所致骨髓抑制小鼠造血功能恢復(fù)，但是它們的作用強(qiáng)度有差異：①低劑量合方組對(duì)造血系統(tǒng)的修復(fù)作用最強(qiáng)，提示一定劑量下，四物湯合用大黃蟄蟲(chóng)丸有協(xié)同增效的作用，體現(xiàn)了中醫(yī)“祛

6、瘀生新”理論的運(yùn)用；②低劑量大黃蟄蟲(chóng)丸與四物湯合用的協(xié)同增效作用機(jī)理，可能和改善造血微環(huán)境，減輕骨髓間質(zhì)充血、水腫，促進(jìn)主要基質(zhì)細(xì)胞骨髓成纖維細(xì)胞增殖，促進(jìn)骨髓細(xì)胞增殖、減少細(xì)胞凋亡率，減輕環(huán)磷酰胺所致氧化損傷等有關(guān)。③單獨(dú)使用大黃蟄蟲(chóng)丸，不管低劑量還是高劑量，其效果都不明顯，且高劑量的大黃蟄蟲(chóng)丸與四物湯合用，其效果甚至沒(méi)有單用四物湯的效果好，說(shuō)明血瘀并不是環(huán)磷酰胺所致骨髓抑制小鼠的主要證候，而是其主要兼證，血虛才是其主要證候，故當(dāng)以補(bǔ)