湖北省致死性家族性失眠癥一家系臨床、病理及基因突變的研究.pdf

1、【研究背景】致死性家族性失眠癥(fatalfamilialinsomnia,FFI)是一種常染色體顯性遺傳性疾病,也是一種朊蛋白(PrionProtein,PrP)病,伴有朊蛋白基因(PrionGene,PRNP)D178位點上的天冬氨酸突變?yōu)樘於０贰FI主要的臨床表現(xiàn)為進行性兇險的失眠癥,睡行癥,幻覺,以交感神經(jīng)興奮(高血壓、心動過速、多汗、高熱)為主的自主神經(jīng)功能失常,認知改變(如注意力不集中、一般智力正常的短暫記憶缺失等),共

2、濟失調(diào),內(nèi)分泌異常等,稍后發(fā)展為精神混亂,癡呆,最終死亡。大多數(shù)人的發(fā)病年齡一般在20歲至61歲之間,平均發(fā)病年齡約50歲。FFI典型的病程為7到36個月,平均周期為18個月。該病的神經(jīng)病理學改變?yōu)榍鹉X的退行性變,主要是腹前核和腹內(nèi)側(cè)核;下橄欖核和小腦的一些改變以及大腦皮質(zhì)海綿樣變。該疾病的診斷目前主要依靠臨床表現(xiàn)、病理改變等綜合考慮。雖然目前人們對該疾病有了進一步的認識,但其確切發(fā)病機制仍不十分清楚。近年來,不少學者從蛋白水平、基因遺

3、傳和基因突變等方面探討其發(fā)病機制,以尋求新的診斷、治療和預(yù)防方法。
　　目前國內(nèi)外對FFI的相關(guān)文獻報道較少,法醫(yī)學界的報道更是罕見。本課題應(yīng)用常規(guī)病理學方法、HE染色,免疫組織化學技術(shù),朊蛋白基因測序等技術(shù),結(jié)合家系調(diào)查和臨床分析對法醫(yī)工作中湖北省內(nèi)首個FFI家系進行分析研究,為進一步探討FFI的病因、臨床表現(xiàn)、病理變化、基因特點、發(fā)病機制及診斷提供思路,為以后的法醫(yī)學鑒定工作提供理論指導和科學依據(jù)。
　　【目的】本研究課

4、題通過對湖北省首個FFI家系成員的臨床表現(xiàn)、腦標本的HE染色、免疫組化染色、基因測序分析及家系調(diào)查等進行分析研究,為FFI的法醫(yī)病理學鑒定提供科學依據(jù),為提高人們對FFI的認識及診治提供參考資料。
　　【材料和方法】本研究材料為華中科技大學同濟醫(yī)學院法醫(yī)學系法醫(yī)病理教研室2010年的法醫(yī)病理學尸檢案例資料,包括FFI家族的病例資料、先證者腦標本、常溫保存的蠟塊及切片;先證者血液及其家系親屬的血液。腦標本經(jīng)10％福爾馬林液固定,石蠟

5、包埋,常規(guī)切片,HE染色和免疫組化染色,后者包括:剛果紅染色、過碘酸-Schiff反應(yīng)(PAS)、髓磷脂堿性蛋白(MBP)、CD68、CD43、CD20、CD3、CD79a、NF染色,對染色結(jié)果進行觀察和分析;用基因測序技術(shù)對先證者及其家屬血液進行朊蛋白基因測序,并對測序結(jié)果進行分析。
　　【結(jié)果】①家系調(diào)查:先證者的母親死前有類似的癥狀,高度懷疑為FFI,但現(xiàn)已無法考證;先證者小姨也出現(xiàn)了相似的癥狀,失眠癥狀突出,但白天可正常工

6、作和生活。②先證者尸解病理變化:大腦,尤其是丘腦的神經(jīng)元變性、神經(jīng)細胞丟失及膠質(zhì)細胞增生;小腦普肯耶細胞數(shù)量減少或呈固縮、變性;免疫組化染色:右額極、丘腦剛果紅(-);丘腦和豆狀核部分神經(jīng)元示PAS(+);未見PrP淀粉樣斑。③基因特征:先證者及其小姨PRNP中存在532位G堿基突變?yōu)锳,導致178位氨基酸-天冬氨酸(Asp,所在序列堿基GAC)突變?yōu)樘於０?Asn,所在序列堿基AAC),即D178N的突變,該突變與129位甲硫氨酸(