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1、目的:探討白藜蘆醇(resveratrol,Resv)對(duì)HUVEC細(xì)胞增殖和管型形成的影響及可能的作用機(jī)制。
方法:通過(guò)MTT法的檢測(cè),觀察不同濃度的LPS對(duì)HUVEC細(xì)胞增殖產(chǎn)生的影響;通過(guò)劃痕法觀察LPS對(duì)HUVEC細(xì)胞遷移能力產(chǎn)生的影響;通過(guò)血管形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的管型形成;通過(guò)亞硝酸還原酶法檢測(cè)一氧化氮(NO)的水平;RT-PCR法檢測(cè)LPS對(duì)HUVEC細(xì)胞中CXCR4、VEGF、MMP-2、COX-2和iNOS的mRN
2、A表達(dá)水平的影響,Western Blot法檢測(cè)LPS對(duì)HUVEC細(xì)胞中p-ERK和p-JAK2的蛋白表達(dá)水平的影響。并且,檢測(cè)Resv對(duì)LPS誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞增殖、遷移、管型形成、NO分泌的影響;以及Resv對(duì)LPS誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞中CXCR4、VEGF、MMP-2、COX-2和iNOS的mRNA表達(dá)水平,和p-ERK及p-JAK2的蛋白表達(dá)水平的影響。
結(jié)果:MTT結(jié)果表明,當(dāng)LPS濃度為10 ng/ml時(shí)可促進(jìn)H
3、UVEC細(xì)胞增殖(P<0.01);劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,濃度為10 ng/ml的LPS可促進(jìn)HUVEC細(xì)胞的遷移作用(P<0.01);血管形成驗(yàn)結(jié)果表明,LPS可顯著促進(jìn)細(xì)胞的管型形成(P<0.01);檢測(cè)NO的亞硝酸還原酶法(Griess Reagent)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,LPS可使細(xì)胞分泌的NO含量明顯增多(P<0.01); RT-PCR結(jié)果表明,LPS對(duì)HUVEC細(xì)胞中CXCR4、VEGF、MMP-2、COX-2和iNOS的mRNA表達(dá)有
4、明顯促進(jìn)作用;Western Blot結(jié)果表明,LPS可以顯著誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞內(nèi)ERK和JAK2蛋白的磷酸化;同時(shí),結(jié)果顯示Resv可以對(duì)LPS誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞增殖、遷移、管型形成和NO的分泌產(chǎn)生明顯的抑制作用,明顯降低LPS誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞中CXCR4、VEGF、MMP2、COX-2和iNOS的mRNA表達(dá)水平;抑制HUVEC細(xì)胞內(nèi)ERK和JAK2蛋白的磷酸化。
結(jié)論:Resv可顯著抑制LPS誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞增
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