維甲酸誘導(dǎo)腭裂模型中胚鼠腭組織與母體多器官的核磁共振代謝組學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　先天性腭裂是常見的顱頜面畸形，其病因尚未清楚。代謝組學(xué)是一門新興學(xué)科，能夠通過研究小分子代謝物質(zhì)的整體變化規(guī)律來表征生物過程，在腭裂病因?qū)W研究中越來越受到重視。本研究的目的是運(yùn)用基于核磁共振技術(shù)的代謝組學(xué)研究維甲酸誘導(dǎo)的胚鼠腭裂組織與母體多器官的代謝變化，探討腭裂發(fā)生機(jī)制。
　　方法：
　?、沤⒗ッ餍∈箅窳涯Ｐ停簩?4只昆明孕鼠隨機(jī)分為對照組和維甲酸組，每組12只，在胚胎10.5天，對實(shí)驗(yàn)組按70mg/k

2、g劑量使用維甲酸灌胃，而對照組使用植物油灌胃。⑵在孕期14.5天（E14.5）應(yīng)用7.0T1H-NMR檢測胚鼠的腭組織，母鼠羊水、胎盤以及肝組織在體代謝物的含量。⑶分離胚鼠的腭組織，母鼠羊水、胎盤、血清以及肝組織，并經(jīng)過勻漿、萃取、凍干、吹干，提取水溶性代謝物和脂溶性代謝物。⑷應(yīng)用9.4T1H-NMR檢測胚鼠胎腭組織，母鼠羊水、胎盤、血清以及母體肝水溶性代謝物和脂溶性代謝物。⑸運(yùn)用主成分分析法探尋生物標(biāo)志物，尋找腭裂發(fā)生過程中的關(guān)鍵代謝

3、通路，以及多器官之間的代謝物關(guān)聯(lián)性。
　　結(jié)果：
　　①腭組織：7T顯示維甲酸組的脂質(zhì)/膽堿、脂質(zhì)明顯增高（p<0.05）。9.4T檢測顯示維甲酸組，降低的代謝物包括：磷酸膽堿、谷氨酰胺,而增強(qiáng)的代謝物包括：膽堿、檸檬酸、甜菜堿、葡萄糖、膽固醇和脂。②羊水：7T顯示維甲酸組的膽堿顯著性降低（p<0.05）。9.4T磁共振顯示：降低的代謝物包括：膽堿、檸檬酸、膽固醇，而未見明顯增強(qiáng)的代謝物。通過羊水代謝成功建立預(yù)測模型PCA-

4、class(RA)、PCA-calss(control)，并且在腭組織和羊水組織的O2PLS模型中發(fā)現(xiàn)膽堿具有正相關(guān)性（皮爾森相關(guān)系數(shù)為0.427）。③胎盤組織：7T顯示維甲酸組脂質(zhì)/膽堿明顯增高（p<0.05）。9.4T檢測顯示維甲酸組，降低的代謝物包括：磷酸膽堿、谷氨酰胺、?；撬幔鰪?qiáng)的代謝物包括：檸檬酸、甜菜堿、膽固醇。④肝臟：7T顯示維甲酸組可見膽堿降低，而脂肪/膽堿明顯增高（p<0.05）。9.4T檢測顯示維甲酸組，降低的代

5、謝物有甘氨酸；而增強(qiáng)的代謝物包括：丙氨酸、磷酸膽堿、?；撬帷⒛懝檀己椭|(zhì)。⑤血清：9.4T磁共振顯示：降低的代謝物包括：膽堿、檸檬酸、膽固醇、肌酸、谷氨酰胺，而未見明顯增強(qiáng)的代謝物。
　　結(jié)論：
　?、拍憠A代謝、膽固醇代謝和三羧酸循環(huán)是維甲酸組腭組織（E14.5）發(fā)生改變的關(guān)鍵代謝通路。⑵通過羊水的代謝物分析建立穩(wěn)定的腭裂預(yù)測模型，而膽堿在羊水與腭組織的正相關(guān)性是這個(gè)預(yù)測模型的內(nèi)在因素。⑶代謝組學(xué)分析提示維甲酸組能誘導(dǎo)胎盤功