甲減的血清核磁共振代謝組學(xué)研究及不同劑量右歸丸療效對比.pdf

1、目的:
　　臨床研究部分:通過對甲減患者和健康志愿者的血清進(jìn)行代謝組學(xué)檢測，分析甲減患者內(nèi)源性代謝產(chǎn)物差異，從代謝組學(xué)角度探討甲狀腺機(jī)能減退的生物學(xué)本質(zhì)，并分析差異性代謝產(chǎn)物可能涉及的代謝通路。
　　動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究部分:通過丙基硫氧嘧啶灌胃大鼠造模，以甲功為判斷標(biāo)準(zhǔn)，從代謝組學(xué)角度對比甲狀腺功能正常與減退的SD大鼠血清，尋找相關(guān)的生物標(biāo)志物，分析甲減疾病發(fā)病的特征代謝物，觀察不同劑量右歸丸對實(shí)驗(yàn)性甲減大鼠的作用，尋求中醫(yī)治療的

2、可能機(jī)制或作用靶點(diǎn)，了解中藥的量效關(guān)系，尋找最佳治療劑量方案。
　　方法:
　　用1H-NMR的代謝組學(xué)技術(shù)結(jié)合模式識別方法和SIMCA-P12.0統(tǒng)計(jì)分析方法，臨床研究部分:收集健康組及甲減組患者血漿樣品，分析甲減患者潛在的生物標(biāo)志物。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分:通過丙硫灌胃造成實(shí)驗(yàn)性甲減大鼠模型，以甲功為標(biāo)準(zhǔn)，分析正常組及實(shí)驗(yàn)性甲減大鼠的血清代謝物的特征及變化。并在此甲減模型基礎(chǔ)上給甲減組大鼠中成藥右歸丸2月，通過與給予甲減組大鼠優(yōu)甲

3、樂2月后的治療效果對比，分析不同劑量中成藥右歸丸對實(shí)驗(yàn)性甲減大鼠的血清代謝物的特征及變化。
　　結(jié)果:
　　一、臨床研究部分:
　　正常組與甲減組患者血清代謝譜有不同的代謝特征。與正常對照組相比，甲減患者血清中的不飽和脂肪酸、三羧酸循環(huán)代謝物（α-酮戊二酸和丙酮酸）、膽堿、瓜氨酸、3-羥基丁酸的含量降低。苯丙氨酸、酪氨酸、丙氨酸、糖蛋白升高。
　　二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分:
　　（一）甲功方面:
　　1.造模

4、后:與正常組相比，給予造模藥組大鼠在造模后出現(xiàn)類似于甲減腎陽虛的行為學(xué)改變，且給予造模藥組FT4、FT3數(shù)值較正常組明顯下降(P＜0.01)，TSH值較正常組升高(P＜0.05)，提示甲減模型成功。
　　2.給予治療藥后:
　　(1)FT3:西藥組、右歸丸中劑量組和正常組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與模型組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，均已恢復(fù)正常值，而右歸丸低劑量組、右歸丸高劑量組與正常組相比，差異有

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，與模型組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，均未恢復(fù)正常值;
　　(2) FT4:各中藥給藥組均低于正常組值，且各中藥給藥組和正常組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，與模型組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，表明各中藥給藥組FT4均未恢復(fù)正常值，而西藥組顯著高于正常組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，表明優(yōu)甲樂對于甲減大鼠具有較強(qiáng)升高FT4作用;
　　(3)TSH:西藥組與正常

6、組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，表明西藥組TSH已恢復(fù)正常，各中藥給藥組與正常組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，與模型組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，表明各中藥給藥組TSH未恢復(fù)正常。
　?。ǘ┐x組學(xué)方面:
　　1.造模后:與正常組相比，我們發(fā)現(xiàn)造模后的SD大鼠血清代謝產(chǎn)物存在差異:血液中的與正常對照組相比，給予造模藥大鼠血清中肌酐、乳酸、LDL/VL

7、DL、N-乙酰糖蛋白的含量升高，不飽和脂肪酸、三羧酸循環(huán)代謝物（檸檬酸、α-酮戊二酸和琥珀酸）、磷酸膽堿、瓜氨酸、3-羥基丁酸、O-乙酰糖蛋白的含量降低。
　　2.給予治療藥后:與造模后治療前相比，各治療組血清中三羧酸循環(huán)產(chǎn)物（檸檬酸、α-酮戊二酸，琥珀酸）、瓜氨酸含量上升，乳酸含量下降，右歸丸中劑量組、高劑量組、西藥組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而右歸丸低劑量組與治療前相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;西藥組及各中藥治療組大鼠血清中LDL/VLD

8、L較前降低，但西藥組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各中藥治療組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;不飽和脂肪酸、磷酸膽堿、3-羥基丁酸在各治療組大鼠血清中含量均較前升高，但只有西藥組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各中藥治療組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;肌酐在各治療組中大鼠血清中含量均較前降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;N-乙酰糖蛋白在西藥組大鼠血清中含量較前降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在中藥各治療組大鼠血清中含量較前差異不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;0-乙酰糖蛋白在各治療組中大鼠血清中含量較前

9、均升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　一、臨床研究部分:
　　甲減患者中存在著能量代謝、脂代謝、氨基酸代謝、苯丙氨酸代謝、丙氨酸-葡萄糖代謝方面的異常，經(jīng)代謝組學(xué)檢測，甲減患者中有差異的代謝產(chǎn)物:膽堿，不飽和脂肪酸、3-羥基丁酸、丙氨酸、α-酮戊二酸、丙酮酸、苯丙氨酸、酪氨酸、糖蛋白、瓜氨酸。這些化合物可能成為鑒別甲減的客觀指標(biāo)，為甲減前期診斷提供了參考。
　　二、實(shí)驗(yàn)研究部分:
　?。ㄒ唬┙o予造模

10、藥后大鼠出現(xiàn)甲減腎陽虛的行為學(xué)改變，其甲功臨床指標(biāo)FT3、FT4水平降低，TSH水平升高，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，從大鼠的癥狀，血清中三種甲狀腺激素水平看，甲減的模型成功。
　?。ǘ仃栄a(bǔ)腎中藥右歸丸對甲減模型大鼠具有較好的治療作用，各治療組均能不同程度鼓舞陽氣，改善其甲減癥狀，促進(jìn)機(jī)體的功能活動(dòng)，中等劑量的右歸丸能改善低水平甲狀腺激素，從而對甲減具有防治作用。
　?。ㄈ┙?jīng)核磁共振檢測，甲減模型組大鼠與正常組大鼠血漿代謝譜存在差