甲亢和Wilson病的核磁共振代謝組學(xué)方法研究.pdf

1、代謝組學(xué)方法是上世紀90年代中期發(fā)展起來的一門新學(xué)科，它借助高通量、高靈敏度與高精確度的現(xiàn)代分析技術(shù)，分析細胞、組織和生物體液中內(nèi)源性代謝物的整體組成，并通過代謝物復(fù)雜的、動態(tài)的變化，辨識和解析被研究對象的生理病理狀態(tài)。本文將核磁共振代謝組學(xué)方法應(yīng)用于兩種代謝性疾病的研究中，甲狀腺功能亢進是一種代謝性增強的疾病，Wilson病(Wilson's disease，WD)是機體內(nèi)對銅代謝不足導(dǎo)致銅在體內(nèi)大量積累的疾病。運用核磁共振代謝組學(xué)研

2、究方法，分析兩種代謝性疾病所導(dǎo)致的代謝改變，尋找了甲亢和Wilson病的特征代謝物。對甲亢疾病的研究中，進一步分析了家族性甲亢的代謝差異。對Wilson病的研究中，綜合探討了Wilson病早期、模型期以及青霉胺藥物干預(yù)后的代謝差異，為Wilson病的早期診斷和治療以及藥物療效的評價提供科學(xué)依據(jù)。本論文的主要內(nèi)容歸納如下：
　　 一、簡要介紹了基于NMR的代謝組學(xué)方法及其應(yīng)用。概述了NMR代謝組學(xué)方法在疾病研究方面的進展。

3、　　 二、總結(jié)并分析NMR代謝組學(xué)中常用的生物樣品的處理方法，主要包括血液、尿液和生物組織樣品。討論這些生物樣品的理化性質(zhì)、內(nèi)源性代謝物、樣品的采集、保存以及實驗樣品的配制等。
　　 三、應(yīng)用高分辨液體1H NMR譜學(xué)結(jié)合模式識別方法，研究了甲亢患者的血清和尿液。結(jié)果表明，與正常人相比，甲亢患者血清中，膽堿、葡萄糖、三甲胺等物質(zhì)的含量升高，而VLDL、LDL、膽固醇等脂質(zhì)，以及乳酸、糖蛋白、丙氨酸等代謝物的含量下降；甲亢患者尿

4、液中的葡萄糖、檸檬酸、?；撬嵋约凹“彼岬却x物的含量升高，而馬尿酸、TMAO、甲酸、琥珀酸等代謝物的含量下降。由于甲亢疾病有一定的家族遺傳性，進一步研究了家族遺傳性甲亢代謝差異，尋找家族遺傳性甲亢的代謝改變。
　　 四、應(yīng)用高分辨液體1H NMR譜學(xué)結(jié)合多元數(shù)據(jù)分析方法，研究了Wilson病模型大鼠早期、模型期以及青霉胺藥物干預(yù)后代謝變化。WD模型組中，血清中的乳酸、肌酸、肌酐、亮氨酸、異亮氨酸含量顯著升高，葡萄糖、TMAO、肌

5、醇和甘氨酸等物質(zhì)的含量下降；WD組尿液中，丙酮、肌酸、肌酐以及三羧酸循環(huán)中間產(chǎn)物以及酮體物質(zhì)的含量升高，葡萄糖、甘氨酸的含量下降。血清中顯著升高的乳酸和尿液中的大量增加的乙酸表明Wilson病導(dǎo)致糖代謝和能量代謝的紊亂。尿液中增加的酮體物質(zhì)，改變的丙氨酸和葡萄糖表明WD大鼠中肝臟受到了損傷。血清和尿液中顯著升高的肌酸和肌酐是腎臟受損的標志。血清和尿液中膽堿及其代謝產(chǎn)物甜菜堿含量的減少表明膽堿代謝發(fā)生了紊亂。與WD模型組相比，青霉胺干預(yù)后