仿刺參中多糖活性成分研究.pdf

1、仿刺參(ApostichopusjaponicusSelenka)屬于棘皮動物門(Echinodermata)、海參綱(Holothuroidea)、楯手目(Aspidochiroia)、刺參科(Stichopodidae)、仿刺參屬(Apostichopus)的海洋動物。廣泛生長在我國北方海域,是一種及其著名的營養(yǎng)保健食品,具有重要的經(jīng)濟價值。
　　 本課題對遼寧省大連海域的仿刺參(A.japonicusSelenka)中的多

2、糖進行了系統(tǒng)的化學和生物活性研究。采取水提取法進行提取,用膜分離技術和乙醇沉淀法純化,Sevage法去除蛋白,雙氧水脫色制備得仿刺參粗多糖。以仿刺參凍干粉為原料提取仿刺參粗多糖的得率均值為8.55％。應用超濾裝置,DEAE-纖維素柱層析,SephadexG-100柱層析,高效凝膠過濾色譜(HPGFC)等多種分離技術對仿刺參粗多糖進行分離純化得到以下均-多糖組分,AJP-1(得率為5.840％)、AJP-2(得率為6.480％)、AJP-

3、3(得率為6.816％)、AJP-4(得率為6.344％)、AJP-5(得率為8.768％)。上述多糖組分經(jīng)紫外掃描不含蛋白質(zhì)和氨基酸,經(jīng)HPGFC檢測均一性較好。
　　 各仿刺參多糖組分樣品為乳白色絮狀粉末,易溶于水和二甲基亞砜,不溶于乙醇、丙酮等有機溶劑,硫酸-苯酚反應和Molish反應均為陽性。AJP-1:相對分子量為101291Da,糖醛酸的含量是樣品中最高的,含量為1.1170％。AJP-2:相對分子量為73010Da

4、,糖醛酸含量為0.4202％。AJP-3:相對分子量為39638Da,糖醛酸含量為0.5046％。AJP-4:相對分子量為9716Da,糖醛酸含量較低,無法檢測出具體的質(zhì)量百分比。AJP-5:相對分子量為2213Da,樣品未檢測出糖醛酸。
　　 所得各個仿刺參多糖組分中糖組成有一定的差異,除AJP-5不含巖藻糖和糖醛酸外,其余都含有巖藻糖、葡萄糖、氨基糖和糖醛酸。組成成分相同的多糖它們的單糖的含量比例也不同,而且糖苷鍵類型也有差

5、異。仿刺參多糖樣品基本上均含有羥基、羧基、乙酰胺基、硫酸酯基以及巖藻糖的甲基,且不同海參多糖硫酸酯基的取代位點略有差異。所得多糖樣品均為α構型。除AJP-5外,其余多糖樣品都主要含有C-2,4位的雙硫酸酯基取代,而且大部分都同時含有C-3,4位的雙硫酸酯基取代、C-4位的單硫酸酯基取代以及未被硫酸酯化的巖藻糖。
　　 仿刺參多糖樣品的抗凝血活性實驗顯示,多糖樣品濃度在一定劑量下顯著延長凝血酶時間(TT)。AJP-1的相對分子量大

6、于10萬,抗凝血效果最好;AJP-2與AJP-3相對分子量在3-8萬之間,抗凝效果次之;而AJP-4相對分子量在1萬左右,抗凝效果不明顯。相對分子量大的仿刺參多糖抗凝效果強于相對分子量小的仿刺參多糖,可能與多糖含有的硫酸酯基、糖醛酸、氨基糖、巖藻糖等的含量與取代情況以及糖鏈結構有關;相對分子量1萬以下的仿刺參多糖抗凝效果不佳,這可能是由于多糖硫酸酯基、糖醛酸、巖藻糖含量太低的緣故。
　　 仿刺參多糖的PTPσ抑制試驗顯示,對PT