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文檔簡(jiǎn)介
1、本論文以仿刺參糖胺聚糖為研究對(duì)象,選擇了4種分別名為AHG、DAHG-1、DAHG-2和DAHG-3的仿刺參糖胺聚糖,對(duì)其分子量進(jìn)行了測(cè)定,分別為98070、41149、24755和8871。并對(duì)其在不同給藥濃度情況下進(jìn)行了體外、體內(nèi)抗凝血、抗血栓實(shí)驗(yàn),研究了仿刺參糖胺聚糖的抗凝血機(jī)制和抗凝血、抗血栓活性,為仿刺參糖胺聚糖進(jìn)一步的藥用開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
通過體外實(shí)驗(yàn)考察了不同分子量仿刺參糖胺聚糖抗凝血機(jī)制;研究了其對(duì)大鼠血漿AP
2、TT和PT的影響。結(jié)果表明在濃度為0.2mg/mL時(shí),不同分子量仿刺參糖胺聚糖可以顯著延長(zhǎng)APTT時(shí)間,而PT時(shí)間沒有顯著延長(zhǎng),說明仿刺參糖胺聚糖是通過影響內(nèi)源性凝血途徑來發(fā)揮抗凝血作用。
通過體內(nèi)水平考察了不同分子量仿刺參糖胺聚糖抗凝血、抗血栓活性;研究其對(duì)小鼠出血時(shí)間、凝血時(shí)間、體內(nèi)血栓形成的影響,對(duì)大鼠體外血栓、體內(nèi)血栓和血清內(nèi)t-PA含量的影響。
小鼠出血時(shí)間、凝血時(shí)間實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不同分子量仿刺參糖胺聚糖在
3、一定濃度下均能使小鼠凝血時(shí)間、出血時(shí)間延長(zhǎng)。從凝血時(shí)間來看,AHG在給藥濃度1mg/kg及以上具有顯著凝血效果;而DAHG-1、2、3在給藥濃度10mg/kg及以上同樣具有顯著凝血效果。從止血時(shí)間來看,AHG在給藥濃度1mg/kg及以上同樣顯著延長(zhǎng)出血時(shí)間;而DAHG-1、2在給藥濃度10mg/kg及以上同樣顯著延長(zhǎng)出血時(shí)間;DAHG-3只有當(dāng)給藥濃度為50mg/kg以上才會(huì)顯著延長(zhǎng)出血時(shí)間。凝血時(shí)間、出血時(shí)間會(huì)隨分子量和濃度的增長(zhǎng)而提
4、高。另外,陽性藥物達(dá)肝素CT/BT的值為0.28,不同分子量、不同給藥濃度的仿刺參糖胺聚糖CT/BT的值均大于達(dá)肝素,且仿刺參糖胺聚糖分子量越小,CT/BT的值越高,DAHG-3在腹腔注射濃度50mg/kg時(shí)CT/BT值達(dá)到最高,為0.66,安全性最高。
小鼠體內(nèi)血栓形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,AHG在給藥濃度1mg/kg及以上能顯著提高血栓栓塞小鼠的恢復(fù)率,DAHG-3在給藥濃度50mg/kg以上可以顯著提高血栓栓塞小鼠的恢復(fù)率。與陽
5、性藥物達(dá)肝素對(duì)比,不同分子量仿刺參糖胺聚糖沒能產(chǎn)生顯著性差異。另外,仿刺參糖胺聚糖抑制體內(nèi)血栓形成的能力隨著分子量和濃度的提高而增強(qiáng)。
大鼠體外血栓形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,AHG在給藥濃度0.1mg/kg及以上具有顯著的抑制血栓形成的能力,DAHG-1在給藥濃度1mg/kg及以上具有顯著的抑制血栓形成的能力,DAHG-2、3在給藥濃度10mg/kg及以上具有顯著的抑制血栓形成的能力。與陽性藥物達(dá)肝素相比,AHG在給藥濃度10mg/k
6、g及以上產(chǎn)生極顯著差異,DAHG-1、2在給藥濃度20mg/kg及以上產(chǎn)生極顯著差異。另外,仿刺參糖胺聚糖抑制血栓形成的能力隨著分子量和濃度的提高而增強(qiáng)。
大鼠頸部總動(dòng)脈血栓形成實(shí)驗(yàn)表明,AHG在給藥濃度0.1mg/kg及以上均可以極其顯著的延長(zhǎng)大鼠頸部動(dòng)脈血栓形成時(shí)間(OT),DAHG-1、2、3在給藥濃度1mg/kg及以上均可以極顯著的延長(zhǎng)OT值。與陽性藥物達(dá)肝素相比,AHG在給藥濃度0.1mg/kg及以上產(chǎn)生顯著差異,D
7、AHG-1、2、3分別在在給藥濃度1mg/kg、10mg/kg和20mg/kg及以上產(chǎn)生極顯著差異。另外,仿刺參糖胺聚糖抑制頸部總動(dòng)脈血栓形成的能力隨分子量和給藥濃度增長(zhǎng)而增強(qiáng)。
大鼠血清t-PA含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,AHG在給藥濃度1mg/kg及以上顯著提高t-PA含量,DAHG-1、2在給藥濃度10mg/kg及以上顯著提高t-PA含量,DAHG-3不能提高t-PA含量。與陽性藥物達(dá)肝素相比,僅有AHG在給藥濃度達(dá)到20mg
8、/kg以上時(shí)才產(chǎn)生極顯著差異。由此說明,仿刺參糖胺聚糖在高濃度、高分子量時(shí)可以激活纖溶系統(tǒng)發(fā)揮溶栓作用,且激活能力會(huì)隨分子量和給藥濃度增長(zhǎng)而增強(qiáng)。
綜上,體外抗凝血實(shí)驗(yàn)表明,仿刺參糖胺聚糖是通過影響內(nèi)源性凝血途徑來發(fā)揮抗凝血作用。體內(nèi)抗凝血實(shí)驗(yàn)表明,不同分子量仿刺參糖胺聚糖具有較強(qiáng)的抗凝血、抗血栓活性,且抗凝、抗栓活性會(huì)隨分子量和濃度的增長(zhǎng)而增強(qiáng),安全性隨分子量的降低而提高。大鼠血清t-PA含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)表明,仿刺參糖胺聚糖還可
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