基于化學(xué)發(fā)光動力學(xué)分辨策略的多組分免疫分析方法檢測免疫球蛋白.pdf

1、化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）是將化學(xué)發(fā)光反應(yīng)和免疫反應(yīng)相互結(jié)合，具有高靈敏度、高特異性，以放射免疫分析為理論基礎(chǔ)建立起來的，用來檢測抗原或者抗體的一種非放射標(biāo)記免疫分析法。這種方法具有無需光源、儀器設(shè)備簡單、靈敏度高、特異性強(qiáng)、線性范圍寬、無放射性污染、可實現(xiàn)自動化等優(yōu)點。
　　多組分免疫分析（MIA）是目前臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測、生物分析等領(lǐng)域的研究熱點，具有分析成本低、分析通量高、所需時間短、樣品消耗少等突出優(yōu)點。近年來，大多數(shù)

2、報道的MIA方法通常是基于空間分辨或多標(biāo)記模式。
　　本文基于CLIA，結(jié)合多標(biāo)記模式構(gòu)建了檢測兩種免疫球蛋白的新方法，具體開展了以下工作:
　　本文以新的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)動力學(xué)分辨策略為基礎(chǔ)，提出了一種近同時檢測兩種免疫球蛋白的多組分免疫分析方法。該方法利用化學(xué)發(fā)光動力學(xué)特征具有明顯差異的兩個化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物—吖啶酯和堿性磷酸酶作為信號探針，分別標(biāo)記羊抗鼠IgG和兔抗鼠IgM，形成兩個免疫復(fù)合物，通過競爭免疫分析模式，對兩個分析

3、物小鼠IgG(Mouse IgG，MIgG)和小鼠IgM(Mouse IgM，MIgM)進(jìn)行檢測。當(dāng)加入共反應(yīng)劑時，具有閃光型和輝光型動力學(xué)特征的兩個反應(yīng)同時被觸發(fā)，在反應(yīng)后0.2 s和500 s時，分別記錄這兩個反應(yīng)的化學(xué)發(fā)光信號。該多組分免疫分析方法對于MIgG和MIgM的檢測范圍均為0.50-200 ng mL-1，檢測限為0.16 ngmL-1（S/N=3）。所構(gòu)建的方法沒有明顯的信號重疊，并能夠成功應(yīng)用于檢測小鼠血清樣品中MI