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文檔簡介
1、缺氧是一種常見的損傷因素,海馬是中樞神經系統(tǒng)對缺氧最敏感的部位之一。本實驗采用急性完全缺氧模型和低壓缺氧模型,應用膜片鉗技術和免疫組化技術對大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞的基本電生理特性、正常條件下P2X受體的藥理學特性、缺氧情況下P2X受體功能及表達的變化進行了研究,探討P2X受體各亞型在大鼠海馬CA1區(qū)的表達及缺氧對其功能和表達影響的可能機制,結果如下: 1.顯微鏡下急性分離出的完整的神經元表面光潔,折光性好,胞體呈錐形,細胞突起
2、完整,能迅速貼壁。 2.狀態(tài)良好的錐體細胞易于封接形成全細胞記錄并且能維持較長時間,平均靜息膜電位(RMP)為-54.96±5.24mV,在電流鉗下給予一系列由去極化至超極化的躍階電流刺激(-60-+40pA,step=10,時長200ms),得到電壓-電流曲線,閾值37.119±4.5342mV,時程8.9571±2.1506ms動作電位幅度83.04±10.45mV(n=45)。 3.ATP有反應的細胞占總數的95%
3、(38/40),給予梯度濃度的ATP,結果顯示有明顯的量效關系,應用濃度分別為0.1,1,10,100,1000μmol/L的ATP誘發(fā)的電流值為-2.019±0.508,-3.114±0.682,-9.529±3.928,-17.642±5.451,-18.4175±6.2406應用P2X受體抑制劑suramin對ATP誘發(fā)的電流有顯著抑制作用,在應用P2X受體調節(jié)劑IVM(100μmol/L)與低pH(pH=6.5)的條件下,不同細
4、胞有不同的反應。 4.缺氧情況下,ATP誘發(fā)的內向電流幅度減弱,但是此內向電流對ATP的濃度依賴性依然存在,suramin對該電流依然有抑制作用。 5.免疫組化實驗結果顯示在大鼠海馬CA1區(qū)有多種P2X受體亞型的表達,低壓缺氧可以引起P2X受體各個亞型表達的上調。 綜合以上結果:在大鼠海馬CAI區(qū)P2X受體有多亞型的廣泛表達,根據電生理學和藥理學特性,可以對P2X受體進行亞型分析,缺氧影響下P2X受體功能的下調與
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