新型多粘菌素的抑菌機(jī)制及海洋細(xì)菌NH1T分類及耐藥性的研究.pdf

1、細(xì)菌感染引起的各類疾病一直被認(rèn)為是世界各國(guó)公共衛(wèi)生所面臨的主要威脅和挑戰(zhàn)。在過去的十年里，抗生素的大量使用導(dǎo)致了越來越多的耐藥性細(xì)菌的出現(xiàn)，這對(duì)人類的健康造成了嚴(yán)重的威脅。因此對(duì)新型抗生素及細(xì)菌的耐藥機(jī)制的研究有著十分重要的意義。本論文以一種新型的多粘菌素對(duì)萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌的抗菌活性作為研究對(duì)象，利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)的方法對(duì)新型多粘菌素FADDI-019抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的機(jī)制進(jìn)行探究。其中該抗生素敏感性試驗(yàn)表明，盡管萬古霉素耐藥性金

2、黃色葡萄球菌對(duì)多粘菌素B、E有耐受性，但是兩株菌對(duì)多粘菌素衍生物FADDI-019均增加了敏感性，并且24小時(shí)后未檢測(cè)出任何再生長(zhǎng)現(xiàn)象;掃描電鏡的結(jié)果表明FADDI-019對(duì)VRSA的作用不是直接通過膜損傷造成的，這也暗示了其靶點(diǎn)是在細(xì)胞內(nèi)部;轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)表明經(jīng)過FADDI-019作用后，共有208個(gè)基因差異性表達(dá)，其中有140個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，這其中包括了萬古霉素耐藥調(diào)節(jié)因子、氨基酸、能量及葉酸代謝相關(guān)的基因;68個(gè)基因表達(dá)下調(diào)，它們分別

3、是與VRSA ATCC700699關(guān)鍵毒力因子相關(guān)的基因，這表明FADDI-019除了可以殺滅VRSA ATCC700699,也可以減少其感染時(shí)的毒力;代謝通路分析表明四氫葉酸產(chǎn)物的合成途徑可以作為抑制對(duì)其有依賴的葉酸代謝及氨基酸代謝這兩個(gè)過程的阻塞點(diǎn);最后我們通過對(duì)葉酸代謝節(jié)點(diǎn)的鑒定對(duì)磺胺甲惡唑與FADDI-019聯(lián)合用藥進(jìn)行測(cè)試，該組合表現(xiàn)出了協(xié)同效果，為目前存在的比單一用藥有更強(qiáng)抗菌效果的聯(lián)合用藥提供了新的選擇。
　　本論文

4、還對(duì)一株分離于自然環(huán)境中的海洋細(xì)菌NH1T進(jìn)行了抗生素敏感性及與耐藥性相關(guān)的生物信息學(xué)研究?？股孛舾行栽囼?yàn)表明該菌對(duì)除了氟奎諾酮類抗生素之外的所有測(cè)試過的抗生素均不敏感，表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐藥性;基因組信息表明NH1T總序列長(zhǎng)度為6,131,579bp，其中G+C％為41.94％，共有5908個(gè)開放閱讀框;耐藥基因分析預(yù)測(cè)出10個(gè)匹配嚴(yán)格的耐藥基因，并將比對(duì)結(jié)果按照耐藥基因直系同源（ARO）分類比對(duì)得到了許多抗生素耐藥基因、與耐藥性相關(guān)的外

5、排泵基因及抗生素靶點(diǎn)修飾酶基因。
　　除了對(duì)新型多粘菌素對(duì)VRSA抑菌機(jī)制及海洋細(xì)菌NH1T耐藥性的研究之外，本論文還對(duì)在分離海洋環(huán)境中耐藥菌試驗(yàn)中得到的兩株海洋新細(xì)菌進(jìn)行其多相分類學(xué)的研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明FA028T為交替單胞菌科的新屬新種，命名為底泥海堿菌(Alkalimarinus sediminis gen.nov.sp.nov.)，模式菌株為FA028T(=CICC10906T=KCTC42258T);菌株NH1T可以確定