原發(fā)性高血壓病人血清miRNAs差異表達(dá)譜研究.pdf

1、目的：通過 miRNA芯片技術(shù)獲得原發(fā)性高血壓病人和健康人血清中差異表達(dá)的miRNAs譜，通過qRT-PCR技術(shù)驗(yàn)證芯片結(jié)果的可靠性，生物信息學(xué)分析關(guān)鍵miRNAs調(diào)控的靶基因及所涉及的信號(hào)通路，闡明miRNA在高血壓發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：收集20例高血壓病人和10例健康人的血清標(biāo)本，Trizol試劑提取總RNA；采用miRNA基因芯片技術(shù)檢測(cè)高血壓病人和健康人血清中差異表達(dá)的miRNAs；運(yùn)用qRT-PCR技術(shù)驗(yàn)證芯片篩

2、選出的差異表達(dá)的兩個(gè)miRNAs：miR-132和miR-155；通過生物信息學(xué)分方法分析miR-132和miR-155所調(diào)控的靶基因及涉及到的信號(hào)通路，分析miR-132和miR-155是如何調(diào)控信號(hào)通路影響高血壓的發(fā)生發(fā)展。
　　結(jié)果：
　　1.獲得高血壓病人血清的差異 miRNAs表達(dá)譜。高血壓病人中，上調(diào)的miRNAs有33個(gè)；而下調(diào)的miRNAs有12個(gè)。
　　2.高血壓病人中，基因芯片檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，上調(diào)倍數(shù)最大

3、的為miR-132，上調(diào)29.3389倍；下調(diào)倍數(shù)最大的為miR-155，下調(diào)-15.2452倍。
　　3.20例高血壓病人中，miR-132的相對(duì)平均值為102.8±9.3，10例健康人中， miR-132的相對(duì)平均值為5.2±0.5，上調(diào)倍數(shù)為24.2313倍。20例高血壓病人中，miR-155的相對(duì)平均值為1.6±0.2，10例健康人中，miR-155的相對(duì)平均值為19.1±1.3，下調(diào)倍數(shù)為-12.2337倍，這兩個(gè)miR

4、NA分子在基因芯片中的表達(dá)趨勢(shì)和qRT-PCR驗(yàn)證結(jié)果一致。
　　4. miR-132調(diào)控的靶基因有261個(gè)，miR-155調(diào)控的靶基因有440個(gè)。261個(gè)miR-132調(diào)控的靶基因涉及的信號(hào)通路主要包括：VEGF、MAPK、p53、TGF-β、Wnt等信號(hào)通路；440個(gè)miR-155調(diào)控的靶基因涉及的信號(hào)通路主要包括：MAPK、Jak-STAT、mTOR、ErbB、TGF-β、細(xì)胞骨架等信號(hào)通路。
　　結(jié)論：
　　1

5、.獲得了高血壓病人與健康人血清的 miRNAs差異表達(dá)譜，在高血壓血清中，上調(diào)的miRNAs有33個(gè)，下調(diào)的miRNAs有12個(gè)。
　　2.基因芯片檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，高血壓病人中，上調(diào)倍數(shù)最大的為miR-132；下調(diào)倍數(shù)最大的為 miR-155。血清學(xué)樣本檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，miR-132和miR-155表達(dá)水平與基因芯片結(jié)果一致。說明基因芯片結(jié)果可靠。
　　3.生物信息學(xué)分析結(jié)果表明，miR-132和miR-155調(diào)控的靶基因涉及到信號(hào)通路