動蛋白Kinesin-13A和類錨蛋白AtANK1在植物細(xì)胞中的分布及功能.pdf

1、本文通過免疫金標(biāo)結(jié)合電子顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)AtKinesin-13A定位于擬南芥根冠細(xì)胞高爾基體附近的囊泡膜上。利用相應(yīng)基因的T-DNA插入突變體，發(fā)現(xiàn)AtKinesin-13A缺失突變后，擬南芥根冠分泌活動較旺盛細(xì)胞中高爾基體附近的囊泡數(shù)目明顯減少，而且其直徑也變小，細(xì)胞出現(xiàn)液泡化。通過干旱處理，發(fā)現(xiàn)突變體更早的萎蔫死亡，說明AtKinesin-13A缺失突變體較野生型對干旱更加敏感。根據(jù)以上結(jié)果，本文認(rèn)為AtKinesin-13A可能

2、參與了高爾基體囊泡形成和維持的調(diào)控。 通過簡并RT-PCR和用AtKinesin-13A的抗體免疫印跡發(fā)現(xiàn)煙草中也存在AtKinesin-13A類似蛋白即NtKinesin-13A，其分子量約為120kDa，且其表達(dá)無組織特異性，結(jié)合AtKinesin-13類似基因在棉花、水稻等植物的存在，可以推測Kinesin-13A在植物細(xì)胞中普遍存在。免疫熒光和免疫金標(biāo)發(fā)現(xiàn)NtKinesin-13A也定位于高爾基體附近的囊泡膜上。AtKi

3、nesin-13A與NtKinesin-13A在細(xì)胞中定位的相同，預(yù)示兩者在相應(yīng)植物中可能有相同的生物學(xué)功能。 通過RT-PCR從擬南芥中克隆到一個類錨蛋白基因AtANK1，通過免疫印跡發(fā)現(xiàn)其編碼的蛋白分子量約為70kDa。AtANK1是擬南芥中與人類細(xì)胞高爾基體上119kDa錨蛋白AnkG119最為類似的ANK repeat包含蛋白。AnkG119與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及高爾基體特異的βⅢspectrin和COP Ⅰ共定位，預(yù)示著AnkG1