里氏木霉纖維素酶的分離純化及應用的研究.pdf

1、本文主要研究了里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C30纖維素酶單一組分的分離純化和酶學性質(zhì);纖維素酶單一組分降解纖維素的機理及纖維低聚糖制備技術(shù);在此基礎(chǔ)上研究纖維低聚糖對雙歧桿菌的增殖作用及雙歧桿菌代謝纖維低聚糖的產(chǎn)物組成.主要研究結(jié)果如下: 通過硫酸銨分級沉淀、HiPrep 26/10 Desalting凝膠過濾脫鹽、Source 15 Q陰離子交換,里氏木霉纖維素酶得以初步分開,再經(jīng)過Source 1

2、5 S陽離子交換、HiPrep Sephacryl S-100HR凝膠過濾、Superdex 75 PrepGrade凝膠過濾進一步分離純化,得到兩個電泳純內(nèi)切葡聚糖酶組分EGⅠ、EGⅡ和一個外切葡聚糖酶組分CBHI;經(jīng)SDS-PAGE電泳測得分子量分別為56.2kDa、52.2kDa和69.0kDa. 研究了內(nèi)切葡聚糖酶EGⅠ、EGⅡ和外切葡聚糖酶CBHI降解纖維素的機理及纖維低聚糖制備技術(shù).內(nèi)切葡聚糖酶EGⅠ和外切葡聚糖酶C

3、BHI不適合纖維低聚糖的制備.以內(nèi)切葡聚糖酶EGⅡ酶法制備纖維低聚糖,最佳酶用量1IU/g纖維素,最佳酶解時間90min,制備得到的纖維低聚糖中纖維二糖、纖維三糖和纖維四糖占總糖的比例分別為43.8％、34.8％和7.9％. 以葡萄糖、纖維二糖、纖維低聚糖為碳源增殖青春雙歧桿菌,葡萄糖對雙歧桿菌的增殖效果最好,其次是纖維低聚糖.菌體濃度增殖倍數(shù)分別為5.95、2.14和2.84倍.青春雙歧桿菌代謝葡萄糖、纖維二糖和纖維低聚糖的主