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1、丫689783摘要以褐藻裙帶菜〔Undariapinnatifida)為實(shí)驗(yàn)材料,建立一套能夠分離出有光活性色素蛋白復(fù)合物的技術(shù)路線。通過對裙帶菜色素蛋白復(fù)合物分離技術(shù)及其影響因素的研究,確立了褐藻的SDGC分離方法。采用蔗糖密度梯度超速離心的方法,以去污劑SDS為增溶劑(SDS:Chl二20:14℃增溶20分鐘)蔗糖密度梯度為60%50%40%30%20%15%和10%從裙帶菜中成功地分離出5條含色素的蛋白質(zhì)復(fù)合物帶.測定裙帶菜各色素
2、蛋白復(fù)合物的吸收光譜、熒光發(fā)射光譜和熒光激發(fā)光譜,并進(jìn)行了DCIP的光還原測定和化學(xué)法的氧化還原差示光譜測定。確定了10%和15%層帶的色素蛋白復(fù)合物為捕光色素復(fù)合物20%和30%層帶的復(fù)合物為PS11顆粒,具有DCIP的光還原活性40%層帶復(fù)合物為去除了捕光色素的PS工復(fù)合物。對于有DCIP光還原活性的20%和30%層帶的復(fù)合物,進(jìn)一步DEAE離子交換層析純化。l50mMNaCl洗脫純化后的樣品經(jīng)過熒光激發(fā)光譜測定發(fā)現(xiàn),己經(jīng)去除了葉綠
3、素c和墨角藻黃素,并且仍然具有DCIP的光活性,分析是PS11核心復(fù)合物。在裙帶菜純化的類囊體膜和PSl復(fù)合物的熒光光譜中,均未發(fā)現(xiàn)屬于PS工的730nm的熒光發(fā)射峰,指出730nm熒光峰不能作為PSI的表征。文中符號與緒寫PSIPSIICytb6fChlFCPCP680P700DIGSDSTritonX100PAGESDGCPMSFTrisTricineEDTAHepesDPCDCIPDEAE纖維素52光系統(tǒng)I光系統(tǒng)II細(xì)胞色素bbf
4、葉綠素墨角藻黃素一葉綠素ac一蛋白質(zhì)復(fù)合物光系統(tǒng)n反應(yīng)中心葉綠素光系統(tǒng)I反應(yīng)中心葉綠素毛地黃皂貳十二烷墓硫酸鈉曲拉通X100聚丙烯酸胺凝膠電泳蔗搪密度梯度超速離心苯甲荃磺酞氟三經(jīng)氨基甲烷三(輕甲基)甲基甘氨酸乙二胺乙酸4(2M乙基)呱嗦1一乙磺酸二苯卡巴脈2.6一二抓酚靛酚DEAECellulose52本論文得到了中國科學(xué)院海洋研究所實(shí)驗(yàn)海洋生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主持的國家自然荃金重點(diǎn)項(xiàng)目“藻類光系統(tǒng)反應(yīng)中心復(fù)合物的分離純化”和中國科學(xué)院海洋
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