幾種DNA生物傳感器用于微小RNA和真菌毒素的檢測.pdf

1、生物傳感器是由生物、化學、物理、光學、電子等學科彼此交叉成長的新技術。其中，基于光電技術的生物傳感器的應用最為廣泛，它們具有選擇性好、靈敏度高、分析速度快、成本低、能在復雜體系中進行在線連續(xù)監(jiān)測等優(yōu)點。目前，這些生物傳感技術已被引入在醫(yī)學診斷、食品安全分析等多種領域。本論文將DNA（主要以赭曲霉毒素A和微小RNA為檢測對象）和相關納米技術相結(jié)合，構(gòu)建幾種新型的光學、電化學DNA生物傳感器，并有望將其應用于農(nóng)產(chǎn)品或中藥中真菌毒素的檢測和癌

2、癥的早期診斷中。
　　本研究分為四個部分：第一章：研制了一種基于限制性內(nèi)切酶和發(fā)卡適體探針信號放大技術的DNA電化學生物傳感器，用于檢測赭曲霉毒素A（Ochratoxin A，OTA）。在最佳條件下，傳感器的線性范圍為1.0~20 pg/mL,檢測限達到0.4 pg/mL。在一定條件下，該傳感器能較好地識別復雜體系中的OTA，有望實現(xiàn)實際樣本中OTA的檢測。第二章：基于稀土鋱離子，DNA適體構(gòu)型轉(zhuǎn)變及磁珠技術，研制了一種熒光信號增

3、強型適體生物傳感器，用于檢測小麥中的OTA。通過這種策略，在最佳條件下，檢測OTA的線性范圍為0.1 ng/mL~1 ng/mL，檢測限可達20 pg/mL。與目前常用的OTA檢測方法相比，該方法具有操作簡單、快速、無需繁雜的修飾與標記過程等優(yōu)點。該生物傳感器利用鋱離子的熒光性質(zhì)用于OTA的檢測，有望建立一種方法用于食品安全的常規(guī)質(zhì)量控制。第三章：研制了一種基于DNA保護的銀納米簇熒光探針技術的熒光核酸適體生物傳感器，用于農(nóng)作物中OTA

4、的高靈敏性和選擇性檢測。在最佳條件下，該傳感器對OTA檢測的線性范圍在0.01到0.3 ng/mL之間，最低檢測限為2pg/mL。通過靶標鏈釋放和DNA骨架模板合成銀納米簇技術研制的適體生物傳感器，具有高靈敏性、高選擇性、簡單快速等優(yōu)點，可以用于農(nóng)產(chǎn)品中OTA的檢測。第四章：研制了基于2'-O-甲基修飾的脫氧核酶（Deoxyribozymes or Catalytic DNA，DNAzyme）和雙鏈特異性核酸酶（Duplex Speci