幾種非電活性生物分子檢測(cè)的生物傳感器研制.pdf

1、為了構(gòu)建檢測(cè)非氧化還原活性生物分子的傳感器，本課題引入了電活性標(biāo)記物并結(jié)合電化學(xué)檢測(cè)手段，制備了高靈敏度、具有選擇性的電化學(xué)生物傳感器并檢測(cè)了非氧化還原活性的多肽、蛋白質(zhì)以及DNA。具體的研究工作包括以下兩方面： 一、檢測(cè)含有巰基的非氧化還原活性的多肽及DNA。以多肽以及DNA雜交為模型，采用巰基特異性試劑馬來(lái)酰亞胺-二茂鐵(Fc-Mi)標(biāo)記并檢測(cè)含巰基的多肽以及3’端修飾巰基的寡核苷酸(ODN)。檢測(cè)了含有一個(gè)半胱氨酸殘基的谷

2、胱甘肽以及含三個(gè)半胱氨酸殘基的六肽。通過(guò)對(duì)吸附在電極表面電活性的Fc-Mi進(jìn)行檢測(cè)從而對(duì)多肽定量。上述方法可擴(kuò)展到研究ODN的雜交反應(yīng)。通過(guò)對(duì)完全匹配以及不同數(shù)量堿基錯(cuò)配的靶點(diǎn)ODN檢測(cè)來(lái)證實(shí)該方法用于ODN序列特異性分析的可行性。ODN的檢測(cè)濃度低達(dá)10 fmol·L-1。 二、檢測(cè)非氧化還原活性的蛋白質(zhì)。采用雙功能交聯(lián)試劑4-馬來(lái)酰亞胺丁酸N-羥基琥珀酰亞胺酯(GMBS)和電活性標(biāo)記物巰基二茂鐵(Fc-SH)檢測(cè)表面固定的蛋