鐵調(diào)素在納米硫化鉛和醋酸鉛暴露對仔鼠神經(jīng)損傷中的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討鐵調(diào)素在納米硫化鉛和醋酸鉛致仔鼠神經(jīng)損傷中的作用，為納米硫化鉛和醋酸鉛暴露致神經(jīng)損傷毒性的機(jī)理開辟新途徑，也為納米硫化鉛和醋酸鉛暴露所致疾病的防治提供依據(jù)。
　　方法：1、實(shí)驗(yàn)動物及分組選用SPF級孕鼠30只隨機(jī)分為3組，即對照組、納米硫化鉛組和醋酸鉛組，納米硫化鉛組孕鼠經(jīng)口給入10mg/Kg納米硫化鉛，醋酸鉛組經(jīng)口給入100mg/Kg的醋酸鉛，對照組經(jīng)口給入生理鹽水。仔鼠出生后21天（post-natal day21

2、PND21）斷乳，繼續(xù)給予相應(yīng)的處理直到出生后42天。2、應(yīng)用morris水迷宮進(jìn)行PND21、PND42仔鼠的學(xué)習(xí)和記憶功能檢測。3、應(yīng)用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）法檢測仔鼠皮質(zhì)及海馬中鉛和鐵的含量。4、應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測仔鼠皮質(zhì)及海馬中活性氧（ROS）含量。5、應(yīng)用ELISA等方法檢測仔鼠皮質(zhì)及海馬中糖基化終末產(chǎn)物的含量，抑制羥自由基能力，鐵調(diào)素的變化，白介素-6的含量。6、應(yīng)用Perl's染色法觀察仔鼠皮質(zhì)及海馬中鐵分布

3、情況。7、應(yīng)用RT-PCR檢測皮質(zhì)及海馬中鐵調(diào)素 mRNA的表達(dá)。8應(yīng)用HE染色觀察仔鼠腦組織的病理改變。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，多組間樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD分析，并將數(shù)據(jù)進(jìn)行簡單的相關(guān)性分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、納米硫化鉛及醋酸鉛暴露對仔鼠損傷狀況
　　1）納米硫化鉛及醋酸鉛暴露后PND21、 PND42仔鼠的潛伏期延長，穿

4、越平臺次數(shù)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2）納米硫化鉛及醋酸鉛暴露后仔鼠皮質(zhì)和海馬中活性氧的水平均高于對照組，且納米硫化鉛組PND21、PND42仔鼠皮質(zhì)和海馬中活性氧水平均高于醋酸鉛組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3）納米硫化鉛和醋酸鉛染毒后，PND1、PND21、PND42仔鼠皮質(zhì)及海馬中糖基化終產(chǎn)物含量顯著高于對照組。納米硫化鉛暴露組 PND21、PND42仔鼠海馬和皮質(zhì)中糖基化終產(chǎn)物的含量高于醋酸鉛組（P＜0.05）。4）與對照組比，醋酸鉛染毒

5、后仔鼠皮質(zhì)和海馬中抑制羥自由基能力均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；納米硫化鉛染毒后，仔鼠海馬中抑制羥自由基能力降低，且低于醋酸鉛組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5）與對照組比較，納米硫化鉛及醋酸鉛暴露后PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量減少，出現(xiàn)大量的神經(jīng)元變性壞死，神經(jīng)元細(xì)胞排列紊亂。
　　2、納米硫化鉛及醋酸鉛暴露對仔鼠皮質(zhì)及海馬中鉛，鐵含量影響
　　1）納米硫化鉛和醋酸鉛染毒后，PND1、PND21及PND4

6、2仔鼠皮質(zhì)、海馬中鉛含量均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；且海馬中鉛含量均高于皮質(zhì)中。2）醋酸鉛暴露后，PND1、PND21及PND42仔鼠皮質(zhì)中鐵含量分別為（7.64±1.53）μg/g、（33.74±5.55）μg/g、（46.62±8.70）μg/g，海馬中鐵含量分別為（66.67±20.94）μg/g、（103.48±20.66）μg/g、（47.73±5.62）μg/g；納米硫化鉛暴露后PND1、PND21及PN

7、D42仔鼠皮質(zhì)中鐵含量分別為（6.39±0.69）μg/g、（32.63±6.03）μg/g、（46.20±10.69）μg/g，海馬中鐵含量分別為（164.72±25.92）μg/g、（128.73±21.35）μg/g、（56.92±4.37）μg/g，均高于同期對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；且納米硫化鉛組各日齡仔鼠海馬中鐵含量高于醋酸鉛組（P＜0.05）。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，醋酸鉛暴露后，仔鼠皮質(zhì)及海馬中鐵含量與鉛含量、逃避潛伏期、A

8、GEs呈正相關(guān)；納米硫化鉛暴露后仔鼠皮質(zhì)及海馬中鐵含量與鉛含量、逃避潛伏期、AGEs呈正相關(guān)。3納米硫化鉛及醋酸鉛暴露對仔鼠皮質(zhì)及海馬中鐵調(diào)素，鐵調(diào)素 mRNA及IL-6影響1）醋酸鉛暴露后，PND1、 PND21、PND42仔鼠皮質(zhì)中鐵調(diào)素含量分別為對照組的1.40、1.56、2.00倍，海馬中鐵調(diào)素含量分別為對照組的1.42、1.22、140倍；納米硫化鉛暴露后，PND1、PND21、PND42仔鼠皮質(zhì)中鐵調(diào)素含量分別為對照組的1.

9、57、2.05、2.34倍，海馬中鐵調(diào)素含量分別為對照組的1.54、1.45、1.60倍；且納米硫化鉛暴露組PND21及PND42仔鼠皮質(zhì)及海馬中鐵調(diào)素含量均高于醋酸鉛組。與對照組比較，納米硫化鉛及醋酸鉛暴露后仔鼠皮質(zhì)及海馬中鐵調(diào)素 mRNA表達(dá)增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2）納米硫化鉛及醋酸鉛暴露后，PND1、PND21、PND42仔鼠皮質(zhì)及海馬中白介素6含量增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：1、生長發(fā)育期納米硫化鉛及醋酸鉛暴露后