植物提取物XpP-1和紫草素的抗炎作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探索植物提取物Xpp-1和紫草素的抗炎作用及相關(guān)機(jī)制，為抗炎藥物開(kāi)發(fā)提供一定的研究基礎(chǔ)。
　　方法：脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞作為研究Xpp-1抗炎作用的體外細(xì)胞炎癥模型;CpG寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞作為研究紫草素抗炎作用的體外細(xì)胞炎癥模型;MTT法檢測(cè)Xpp-1和紫草素對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的毒性作用;熒光定量PCR檢測(cè)Xpp-1和紫草素預(yù)處理對(duì)炎癥模型細(xì)胞促炎癥細(xì)胞因子mRNA水平影響

2、;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)Xpp-1預(yù)處理對(duì)炎癥模型細(xì)胞促炎癥細(xì)胞因子蛋白水平的影響;免疫印跡法檢測(cè)Xpp-1和紫草素對(duì)炎癥模型細(xì)胞NF-κB和MAPK信號(hào)通路活化的影響;利用小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，ELISA檢測(cè)Xpp-1對(duì)LPS誘導(dǎo)的炎癥小鼠外周血中促炎癥細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響;病理組織切片觀察Xpp-1對(duì)LPS誘導(dǎo)的炎癥小鼠肺組織損傷的影響;觀察Xpp-1對(duì)LPS誘導(dǎo)的炎癥小鼠在72小時(shí)內(nèi)的存活率的影響。
　　結(jié)果：植物提取物X

3、pp-1(6.25-25μM)和紫草素(1-2.5μM)濃度范圍內(nèi)對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞沒(méi)有明顯的毒性作用;在LPS刺激的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中，Xpp-1（12.5μM）對(duì)IL-1β、TNF-α和IL-6在mRNA水平和蛋白水平都有抑制作用(P＜0.05)，并抑制 NF-κB途徑的IKKα/β和NF-κB的磷酸化;在CpG-ODN刺激的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中，紫草素(2μM)抑制TNF-α、IL-1β、IL-12p40mRNA表達(dá)(P＜0.05)

4、，并抑制NF-κB途徑的IKKα/β和NF-κB的磷酸化及MAPK途徑的JNK的磷酸化。
　　體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，在LPS誘導(dǎo)的炎癥小鼠中，Xpp-1(5mg/kg)抑制外周血中促炎癥細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的產(chǎn)生(P＜0.05)，減少肺組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，提高小鼠72小時(shí)內(nèi)存活率(P＜0.05）。
　　結(jié)論：植物提取物Xpp-1抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞IL-1β、TNF-α和IL-6的產(chǎn)生，相關(guān)機(jī)制可能與抑制