不同磺營養(yǎng)對哺乳期母-子碘代謝、甲狀腺功能、仔代發(fā)育及乳腺調(diào)控機制的實驗研究.pdf

1、碘是合成甲狀腺激素的必需原料。碘缺乏與碘過量均可導(dǎo)致甲狀腺形態(tài)與功能發(fā)生變化，從而引發(fā)各種疾病。在腦發(fā)育期的臨界期(即胎兒期和生后早期)缺碘而使甲狀腺功能低下會導(dǎo)致腦發(fā)育受到不可逆轉(zhuǎn)的損害。胎兒期和生后早期的嬰幼兒(母乳喂養(yǎng))的碘營養(yǎng)只能來源于母親，因此孕婦和哺乳婦女的碘營養(yǎng)對于子代的生長發(fā)育尤其腦發(fā)育至關(guān)重要。由于神經(jīng)發(fā)育在生后早期(即哺乳期)仍在進行，以及目前母乳喂養(yǎng)的大力提倡，因此哺乳期婦女的碘營養(yǎng)狀況不容忽視。本課題以此作為立題

2、依據(jù)，做了大量基礎(chǔ)性研究工作，從多個角度和不同層面探討哺乳期母親及其乳腺是否對碘缺乏或碘過量存在一定代償能力(即對嬰幼兒的保護能力)，為哺乳期婦女的碘預(yù)防工作提供實驗依據(jù)。
　　 在本研究中，我們在成功建立了不同程度碘缺乏與碘過量的Wistar大鼠動物模型的基礎(chǔ)上，以哺乳期母鼠和仔鼠為研究對象，對不同碘供給量母、子兩代的碘代謝、甲狀腺功能與形態(tài)的變化進行了全面分析，然后對仔鼠生長發(fā)育的相應(yīng)指標(biāo)和小腦特異性的基因和蛋白進行了測定，

3、最后對哺乳期乳腺的代償機制進行了進一步的研究，為探討哺乳期不同碘供給水平下母鼠乳腺的代償調(diào)控機制及其對仔鼠保護作用提供了科學(xué)合理的解釋，為指導(dǎo)哺乳期婦女科學(xué)補碘提供重要的理論意義。現(xiàn)將本實驗的研究方法、結(jié)果及結(jié)論總結(jié)如下：
　　 一、方法：
　　 按體重將4-6周齡健康Wistar雌性大鼠隨機分為4組：重度缺碘組、輕度缺碘組、正常碘組和碘過量組，每組大鼠食用低碘鼠糧，飲用含不同IK濃度的自來水，使各組母鼠每天碘供應(yīng)量分別

4、為1.24μg、5μg、10μg、300μg。雄鼠按正常組條件飼養(yǎng)。條件喂養(yǎng)8周后交配，取哺乳期14和28天的母鼠及其仔鼠作為實驗研究對象。砷鈰催化分光光度法檢測母鼠和仔鼠的(尿、血、乳汁)碘水平，化學(xué)發(fā)光免疫和競爭結(jié)合放射免疫分析方法檢測血TSH和甲狀腺激素水平，觀察甲狀腺形態(tài)以及仔鼠生長發(fā)育的狀況，測量小腦外顆粒層的消長、實時熒光定量PCR檢測髓鞘堿性蛋白和蒲肯野細胞蛋白-2 mRNA的表達水平，蛋白免疫印跡雜交和免疫組織化學(xué)方法檢

5、測其蛋白表達水平，實時熒光定量PCR檢測母鼠乳腺兩種碘轉(zhuǎn)運蛋白(鈉碘轉(zhuǎn)運體和氯碘轉(zhuǎn)運體)mRNA水平，酶聯(lián)接免疫吸附雙抗體夾心法測定母鼠血清催乳素水平。
　　 二、結(jié)果：
　　 1.不同碘供給量對哺乳期母鼠的影響
　　 1.1 重度碘缺乏
　　 1.1.1 尿碘排泄減少重度碘缺乏組母鼠尿碘與正常組相比始終處于極低的水平。
　　 1.1.2 體內(nèi)碘水平很低重度碘缺乏組母鼠無論是血碘還是乳汁碘均明顯低

6、于正常組。
　　 1.1.3 甲狀腺腫大重度碘缺乏組母鼠的甲狀腺呈現(xiàn)明顯的充血、腫大，甲狀腺絕對重量和相對重量約為正常組的4倍。組織學(xué)研究顯示，呈現(xiàn)典型的小濾泡增生性甲狀腺腫。
　　 1.1.4 甲狀腺功能減退重度碘缺乏組血清TT4及FT4水平下降，TT3及FT3水平在早期略呈代償性增高后下降，呈現(xiàn)明顯甲狀腺功能減退及TSH刺激征象。
　　 1.2 輕度碘缺乏
　　 1.2.1 尿碘排泄減少輕度碘缺乏組母

7、鼠尿碘與正常組相比始終處于較低水平，以保證體內(nèi)接近正常的血碘水平。
　　 1.2.2 體內(nèi)低碘狀態(tài)得以緩解輕度碘缺乏組母鼠血碘為正常組的62.7％、哺乳14天乳汁碘是正常組的51.2％，均明顯高于碘供應(yīng)量的比例(為NI組的50％)。
　　 1.2.3 甲狀腺腫大程度較輕輕度碘缺乏組母鼠的甲狀腺呈現(xiàn)輕度腫大(其重量是正常組的1.5倍)，組織學(xué)研究顯示，出現(xiàn)個別小濾泡增生。
　　 1.2.4 甲狀腺功能接近正常輕度碘

8、缺乏組母鼠的血清激素水平接近甚至個別指標(biāo)還超過了正常組。
　　 1.3 碘過量
　　 碘過量組通過增加尿碘排泄量減少了體內(nèi)碘含量：血碘含量是正常組的20倍。甲狀腺攝碘相對減少，T3合成相對減少，T4合成相對增加，血清激素T4水平高于正常組，而T3水平及T3/T4均低于正常組。甲狀腺組織學(xué)改變顯示出多型性特征，但程度很輕。
　　 2.不同碘供給量對哺乳期仔鼠的影響
　　 2.1 重度碘缺乏
　　 2

9、.1.1 體內(nèi)碘水平很低通過減少尿液碘的排泄，碘缺乏的狀態(tài)得到部分緩解，但是由于攝入碘的含量太少，機體代償能力還不足以緩解體內(nèi)碘缺乏狀態(tài)，仔鼠不可避免地出現(xiàn)了低血碘。
　　 2.1.2 甲狀腺功能減退重度碘缺乏組仔鼠出現(xiàn)了甲狀腺功能減退的表現(xiàn)，血TT4水平明顯低于正常組，組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)甲狀腺呈現(xiàn)同母鼠相似的典型的小濾泡增生性甲狀腺腫。
　　 2.1.3 生長發(fā)育遲緩無論是代表體格生理指標(biāo)的張耳、開眼、長毛以及身長、體重，

10、還是代表神經(jīng)反射的平面翻正成功率、負趨地成功率，以及代表肌肉發(fā)育的前肢懸掛時間，重度碘缺乏組均明顯不如正常組。表明重度碘缺乏組仔鼠在生長發(fā)育上嚴(yán)重落后于正常組，反映出“克汀病”的呆、小、發(fā)育遲緩的明顯特征。
　　 2.1.4 小腦發(fā)育不良重度碘缺乏組仔鼠小腦外顆粒層的增殖和消退明顯延遲于正常組，髓鞘堿性蛋白和蒲肯野細胞蛋白-2的mRNA和蛋白表達也明顯低于正常組，說明重度碘缺乏影響了小腦的正常發(fā)育。
　　 2.2 輕度碘

11、缺乏
　　 2.2.1 體內(nèi)碘水平略低通過減少尿液碘的排泄，仔鼠體內(nèi)碘水平得到較好改善。
　　 2.2.2 甲狀腺功能、小腦和生長發(fā)育均接近正常輕度碘缺乏組仔鼠的甲狀腺激素水平接近于正常組，組織學(xué)形態(tài)也僅出現(xiàn)個別小濾泡的增生。仔鼠小腦外顆粒層的增殖和消退，髓鞘堿性蛋白和蒲肯野細胞蛋白-2的mRNA和蛋白表達與正常組相比，有輕度落后趨勢，但無顯著差異。
　　 2.3 碘過量
　　 碘過量組仔鼠血碘僅為正常組

12、的3-4倍，遠遠小于乳汁碘與正常組的比值，TT4水平、甲狀腺組織形態(tài)與正常組沒有明顯的差異，小腦和生長發(fā)育的各項指標(biāo)僅有輕度落后的趨勢。
　　 3.哺乳期母鼠乳腺對碘的代償機制
　　 3.1 重度碘缺乏乳腺攝碘能力下降嚴(yán)重碘缺乏組乳腺NIS和Pendrin mRNA表達降低；提示長期嚴(yán)重缺碘情況下乳腺的攝碘能力處于失代償狀態(tài)。
　　 3.2 輕度碘缺乏乳腺攝碘能力代償性增強輕度碘缺乏組乳腺NIS mRNA表達增高

13、，而Pendrin mRNA表達降低，提示輕度缺碘情況下雖然抑制了Pendrin mRNA的表達，但是NIS的代償作用起到主導(dǎo)地位。綜合以上，輕度碘缺乏時乳腺攝碘能力增強。
　　 3.3 碘過量
　　 乳腺的攝碘能力代償性下降乳腺的NIS和Pendrin mRNA的表達減弱，乳腺的攝碘能力下降。
　　 三、結(jié)論：綜上所述，嚴(yán)重碘缺乏時母體進入失代償狀態(tài)，呈現(xiàn)明顯甲狀腺功能減退表現(xiàn)和TSH刺激征象，而導(dǎo)致明顯的濾泡

14、增生性甲狀腺腫的形成，乳腺攝碘能力也隨之下降，子代受碘缺乏的影響導(dǎo)致小腦和生長發(fā)育不良；輕度碘缺乏時，哺乳期母鼠通過機體多途徑的代償機制，可維持自身接近正常的甲狀腺功能，同時乳腺攝碘能力增強保護子代少受或免受碘缺乏的影響；對于碘過量(正常碘的30倍)，母鼠具有很強的代償能力，能夠維持自身基本正常的甲狀腺功能，同時乳腺攝碘能力下降保護子代少受或免受碘過量的影響。但乳腺對子代的保護能力有限，主要通過仔鼠自身的代償(增加尿碘排泄量等)來減輕碘