特異性鈉通道調(diào)制劑致-抗傷害的脊髓分子機制研究.pdf

1、本論文采用行為學、免疫組織化學和免疫印跡等方法，對于蝎毒不同的特異性鈉離子通道調(diào)制劑成分致傷害性以及抗傷害性的分子機制進行了系統(tǒng)的研究。主要結果如下： 1.脊髓ERK信號通路在BmK粗毒誘發(fā)相關疼痛反應中的作用被BmK蜇傷癥狀表現(xiàn)為強烈的疼痛、紅腫以及痛覺超敏。我們實驗室最先建立了大鼠實驗性BmK蝎蜇痛模型，并發(fā)現(xiàn)蝎粗毒可劑量和時程依賴性的誘發(fā)持續(xù)2h的自發(fā)痛反應、持續(xù)1周的熱痛敏、持續(xù)3周的鏡像機械痛敏以及持續(xù)炎癥水腫；另對

2、蝎粗毒誘發(fā)疼痛的外周以及中樞機制進行了探討。但是，脊髓胞內(nèi)信號通路在蝎蟄誘發(fā)痛中的作用仍不清楚。 本研究探討了脊髓ERK信號通路對BmK粗毒誘發(fā)相關疼痛反應的貢獻。研究結果顯示，(1)足底注射粗毒可以誘發(fā)脊髓(L4-L5)長時程的pERK激活，且pERK陽性神經(jīng)元主要分布在注射側的脊髓背角淺層，同時深層也有中等數(shù)量的分布。(2)鞘內(nèi)注射U0126可以顯著的抑制BmK粗毒誘發(fā)的自發(fā)痛行為，雙側的機械痛敏以及單側的熱痛敏。(3)鞘

3、內(nèi)注射U0126能夠劑量依賴性的壓抑脊髓c-Fos的表達。(4)鞘內(nèi)注射NMDA受體的拮抗劑MK-801以及非NMDA受體的拮抗劑CNQX能夠顯著地壓抑脊髓ERK的激活。 結論：脊髓ERK信號通路的激活部分依賴于NMDA受體和非NMDA受體，該信號通路對于BmK粗毒誘發(fā)的痛相關行為起重要作用。 2.BmK AS的中樞鎮(zhèn)痛作用及其機制探討B(tài)mK AS是一個來源于東亞鉗蝎的β-like肽類神經(jīng)毒素。前期研究表明，外周注射

4、BmK AS可以劑量依賴性地抑制大鼠福爾馬林誘發(fā)的雙相自發(fā)痛反應，并可緩解角叉菜膠誘導的機械痛敏和熱痛敏，同時也可提高正常大鼠的熱痛閾值。BmK AS外周抗傷害性感受的機制被歸因于對傷害性感受器鈉電流的選擇性調(diào)制。但BmK AS是否具有中樞抗傷害性，其機制如何目前尚不清楚。 本實驗采用整體行為學測定方法以及免疫組化技術，研究了BmK AS的中樞抗傷害性作用。研究結果表明，大鼠鞘內(nèi)注射BmK AS可以劑量依賴性的壓抑福爾馬林誘導