寬葉獨(dú)行菜綠原酸提取優(yōu)化及其與甘藍(lán)型油菜原生質(zhì)體融合.pdf

1、目的：研究寬葉獨(dú)行菜的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，探討綠原酸的提取工藝條件；將甘藍(lán)型油菜和寬葉獨(dú)行菜進(jìn)行體細(xì)胞雜交，培育出具有優(yōu)良性狀的雜種植株，從而實(shí)現(xiàn)對油菜的遺傳改良。
　　方法：通過單因素試驗(yàn)對乙醇濃度、材料粒度、液料比及超聲功率等工藝參數(shù)進(jìn)行研究，并通過響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝，建立寬葉獨(dú)行菜綠原酸提取得率的多元二次回歸方程；利用PEG-高Ca2+、高pH誘導(dǎo)融合的方法，將油菜葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體同寬葉獨(dú)行菜葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體進(jìn)行不對稱融合，然后依次

2、在Pell B固液雙層培養(yǎng)基、Pell C擴(kuò)增培養(yǎng)基、Pell E生根培養(yǎng)基和MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。培育出雜種植株后對其進(jìn)行形態(tài)學(xué)和細(xì)胞學(xué)鑒定。
　　結(jié)果：單因素和響應(yīng)面優(yōu)化綠原酸提取的最優(yōu)參數(shù)為：乙醇濃度80％，材料粒度40目，液料比50:1,超聲功率200W，在此實(shí)驗(yàn)條件下綠原酸取得率的理論值為0.796%，實(shí)際驗(yàn)證值為0.712%。通過在一系列不同培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，并對實(shí)驗(yàn)中各條件因素的調(diào)控，最終獲得了結(jié)合了雙親性狀的雜種植