版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、十字花科蕓薹屬作物油菜是世界四大油料作物之一,也是中國主要的油料作物之一。油菜具有適應(yīng)性強、用途廣、經(jīng)濟價值高、發(fā)展?jié)摿Υ蟮忍攸c。目前,現(xiàn)代生物技術(shù),特別是單倍體培養(yǎng)技術(shù)的廣泛應(yīng)用,極大地促進了優(yōu)質(zhì)油菜育種、高產(chǎn)育種與抗性育種的進一步結(jié)合,不斷創(chuàng)新了一批又一批種質(zhì)資源,也不斷選育出優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)雜交油菜品種。本研究是在前人研究的基礎(chǔ)上,對大田自然環(huán)境下甘藍型油菜的小孢子培養(yǎng)體系進行優(yōu)化研究,建立出適合于大田環(huán)境的油菜DH系群體構(gòu)建技術(shù)體系。
2、 ⑴分批播種試驗從8月28日開始到11月16日結(jié)束,每10d一批,共九批次。結(jié)果發(fā)現(xiàn):第三、四、五和第六期播種的材料才有利于產(chǎn)胚,以第四期播種的材料產(chǎn)胚總量最大,即在9月27日到10月7日之間播種材料更加有利于小孢子培養(yǎng),研究的4個基因型材料中,第四期和第五期播種的材料產(chǎn)胚數(shù)占總產(chǎn)胚數(shù)的71.1%。 ⑵取樣時間研究表明:在蕾苔后期和初花期取花蕾培養(yǎng)有利于小孢子誘導(dǎo)胚狀體的產(chǎn)生,盛花期次之,蕾薹前期和終花期培養(yǎng)效果最差。產(chǎn)胚
3、情況因不同基因型材料有所不同。取單核晚期和雙核早期的小孢子才能產(chǎn)胚,這時多數(shù)花蕾長度3.0~3.5mm,其次2.5~3.0mm的花蕾也有產(chǎn)胚的現(xiàn)象,小于2.5mm和大于4.0mm的花蕾很難產(chǎn)胚。 ⑶通過4℃低溫處理花蕾,12h內(nèi)都適合于小孢子培養(yǎng),當處理時間達到48h后,產(chǎn)胚很少或者基本不產(chǎn)胚,但以4℃低溫處理4h產(chǎn)胚率最高,其次是4℃低溫處理8h。通過4℃低溫處理花序,在24h內(nèi)都適合于小孢子培養(yǎng)。不同基因型材料之間,兩種處理
4、的產(chǎn)胚率差異不顯著;對于同一基因型材料而言,低溫處理花蕾的產(chǎn)胚率不如低溫處理花序的產(chǎn)胚率高。 ⑷選擇含有2.0%有效氯的NaC10消毒花蕾15~20min或者0.1%HgCl2消毒10min都能達到良好的消毒和培養(yǎng)效果。 ⑸游離小孢子提取分離時,B5液體培養(yǎng)基中蔗糖的濃度可以調(diào)整為2%;在胚狀體誘導(dǎo)苗的分化時,1.2%瓊脂+0.02%NAA+2.0mg/L6—BA+3.4mg/L hgNO3+3%蔗糖組合更加有利于胚的分
5、化和苗的形成。 ⑹子葉形或魚雷形胚狀體在1/2MS固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)30d就分化出小植株,畸形胚在含有0.1mg/L的GA3培養(yǎng)基上生長30d后,部分基因型材料可以分化出少數(shù)苗,而不含有GA3培養(yǎng)基上培養(yǎng)的畸形胚,雖能發(fā)育成莖狀、芽狀或葉狀組織,但不能正常分化成苗,有的胚狀體逐漸變成褐色,最終死亡。 ⑺在1/2MS固體培養(yǎng)基中,用含2.0~3.0mg/L多效唑培養(yǎng)幼苗,可以在培養(yǎng)瓶中保存3個月左右,且植株生長健壯,根系發(fā)育
6、良好,對于大田移栽沒有任何影響。 ⑻在生根培養(yǎng)基中加入0.5mg/L的IBA,有助于幼苗根系、生長發(fā)育,根系粗壯,植株生長健壯。但是,高濃度的IBA對植株發(fā)育有一定的抑制作用。 ⑼當生根培養(yǎng)25d后,室內(nèi)煉苗10~15d,待苗完全成活后,陰天移栽到大田環(huán)境中,土壤的消毒和大田環(huán)境的良好管理有助于提高幼苗成活率。 ⑽通過小孢子誘導(dǎo)培養(yǎng)、胚狀體分化及幼苗的生根培養(yǎng),ZB05共培養(yǎng)山240個單株,經(jīng)過煉苗移栽,最后獲得
7、191個單株,田間育性調(diào)查,共獲得112個正??捎仓?。 ⑾用20對引物對隱性核不育系NAB-2及它的雙單倍體植株進行了純度鑒定,篩選出18對引物具有多態(tài)性,共擴增出32個多態(tài)性位點,其中有6對引物能將胚狀體苗和不育系姊妹交后代明顯區(qū)分開來。20對引物中有11對引物都檢測出了胚狀體苗中的一株可育株。從胚狀體苗的純合性觀察,有6個單株在DNA水平上存在一定的多態(tài)性差異,其他單株之間純合性一致。在24個姊妹交后代植株中,沒有檢測出多
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 甘藍型油菜DH作圖群體的構(gòu)建和重要農(nóng)藝性狀及品質(zhì)性狀的QTL分析.pdf
- 甘藍型油菜
- 甘藍型油菜恢復(fù)系輪回選擇群體的遺傳結(jié)構(gòu)分析.pdf
- 不同來源甘藍型油菜品系DH群體遺傳變異研究及抗(耐)菌核病恢復(fù)系選育.pdf
- 新型甘藍型油菜雙單倍體作圖群體的構(gòu)建及其遺傳分析.pdf
- 甘藍型油菜自然群體磷效率的評估.pdf
- 構(gòu)建Ar與Cc亞基因組導(dǎo)入的甘藍型油菜(Brassica napus)導(dǎo)入系群體.pdf
- 甘藍型油菜三系隱性核不育材料研究.pdf
- 特早熟春性甘藍型油菜小孢子培養(yǎng)及DH系的遺傳多樣性研究.pdf
- 利用DH(Doubled Haploid)群體對甘藍型油菜菌核病抗性基因的QTL定位和分析.pdf
- 甘藍型油菜新型不育系mtDNA的RAPD分析.pdf
- 甘藍型油菜小孢子培養(yǎng)技術(shù)體系研究.pdf
- 利用TN群體定位甘藍型油菜硼高效QTLs的研究.pdf
- 甘藍型油菜MAGIC群體的遺傳結(jié)構(gòu)分析及應(yīng)用.pdf
- 甘藍型油菜硼高效雙單倍體群體QW DH的擴建及苗期硼高效QTL的檢測.pdf
- 甘藍型油菜DH195-14同型核不育系及臨保系的標記輔助選育.pdf
- 新型甘藍型油菜輪回選擇群體的建立和拓展.pdf
- 甘藍型油菜生態(tài)雄性不育系533S研究.pdf
- 甘藍型油菜——諸葛菜附加系的基因表達研究.pdf
- 甘藍型油菜無性系性狀標記穩(wěn)定性鑒定.pdf
評論
0/150
提交評論