IFITM1基因在干擾素-γ抑制細(xì)胞生長(zhǎng)機(jī)制中的功能研究.pdf

1、干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)是一種具有重要生理功能的細(xì)胞因子，它能促進(jìn)體內(nèi)的免疫保護(hù)反應(yīng)，并具有抗病毒作用。近年來，大量研究表明IFN-γ能以直接抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的方式阻止腫瘤生成(tumor development)，但是其具體機(jī)制尚不清楚。 IFN-γ的生理功能是通過調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄來實(shí)現(xiàn)的。STAT1(signal transducers and activators of transcription 1

2、)作為IFN-γ信號(hào)通路中重要的轉(zhuǎn)錄因子，介導(dǎo)了IFN-γ調(diào)控的大多數(shù)生理功能。有報(bào)道指出STAT1的存在是IFN-γ抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的必需條件。但是STAT1作為一個(gè)可以調(diào)控眾多基因的轉(zhuǎn)錄因子，其介導(dǎo)IFN-γ抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用機(jī)制仍然需要進(jìn)一步的研究闡明。 IFITM1(interferon induced transmembrahe protein 1)基因在細(xì)胞受到IFN-γ刺激后會(huì)大量表達(dá)，STAT1在此過程中起到了關(guān)

3、鍵的作用。有報(bào)道證明在STAT1缺失的細(xì)胞中，IFN-γ無法誘導(dǎo)IFITM1的表達(dá)。本文通過對(duì)IFITM1基因功能的研究，證明了該基因在IFN-γ抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的通路中起到了至關(guān)重要的作用。在肝癌細(xì)胞株BEL-7404和QSG-7701中過表達(dá)IFITM1基因會(huì)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)；用RNA干擾(RNA interference，RNAi)技術(shù)抑制正常肝細(xì)胞株Chang liver中IFITM1基因的表達(dá)，會(huì)加速細(xì)胞的生長(zhǎng)并且導(dǎo)致原本不具有成瘤性

4、的正常肝細(xì)胞在裸鼠皮下成瘤。此外，通過使用實(shí)時(shí)定量RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaotion)技術(shù)，我們發(fā)現(xiàn)IFITMl基因在肝細(xì)胞肝癌(hepatooellular oaroinoma，HCC)組織中表達(dá)下調(diào)。更為重要的是，抑制IFITMl基因的表達(dá)可以阻滯IFN-γ抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，IFITMl在IFN-γ抑制腫瘤細(xì)胞增殖的過程中起到了重要的作用。

5、 隨后，我們研究了IFITMl影響細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn)：過表達(dá)IFITMl可以引起細(xì)胞在GO-Gl期的阻滯，而這種阻滯細(xì)胞周期的作用是通過p53來實(shí)現(xiàn)的。進(jìn)一步的研究表明，過表達(dá)IFITMl可以激活p53的轉(zhuǎn)錄活性，并增強(qiáng)p53蛋白的穩(wěn)定性。此外，抑制p53的表達(dá)也可以在一定程度上阻滯IFN-γ抑制細(xì)胞增殖的能力。這些研究結(jié)果提示我們：在IFITMl信號(hào)途徑下游，p53也參與了IFN-γ抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的信號(hào)調(diào)節(jié)。除了調(diào)節(jié)p53

6、轉(zhuǎn)錄活性之外，我們發(fā)現(xiàn)IFITMl還可以抑制ERK(extracellular signal-regulated kinese)激酶的活性。IFITMl與Caveolin-1相互結(jié)合，促進(jìn)了Caveolin-1對(duì)ERK活性的抑制。 綜上所述，本文通過對(duì)IFITMl基因具體功能的研究，揭示了IFN-γ抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的分子機(jī)制；并提出了一條新的IFN-γ信號(hào)調(diào)節(jié)通路，為上游的IFN-γ誘導(dǎo)的基因表達(dá)調(diào)控因子STATl與下游的細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)