一種新的粒毛盤菌多糖結(jié)構(gòu)表征、化學(xué)修飾及生物活性研究.pdf

1、本研究經(jīng)發(fā)酵提取、分離純化獲得一種新的粒毛盤菌YM130胞外多糖（LEP-2a），采用單糖組成分析、甲基化分析、傅里葉變換紅外光譜分析和核磁共振光譜分析對LEP-2a進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征，并評價其體外抗腫瘤活性;分別對LEP-2a進(jìn)行乙?；捅郊柞；揎?，并研究LEP-2a及其衍生物對STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的心血管保護(hù)作用。
　　通過高效凝膠滲透色譜(HPGPC)檢測LEP-2a為均一組分，且平均分子量約為1.61×106Da。單糖組成分

2、析結(jié)果表明，LEP-2a由甘露糖和半乳糖組成，且摩爾比為3.8∶1.0。甲基化分析、FT-IR分析和NMR分析結(jié)果表明，LEP-2a的主鏈由1,2-linked-α-D-Manp、1,2,6-linked-α-D-Manp、1,3,4-linked-α-D-Manp和1，3-linked-β-D-Galp組成。體外抗腫瘤活性研究表明，在濃度為100、200、300和400μg/mL時，LEP-2a能夠顯著增強5-氟尿嘧啶對Hela細(xì)胞的

3、抑制作用。
　　分別對LEP-2a進(jìn)行乙?；捅郊柞；揎棧@得取代度為0.220的乙?；疞EP-2a(ALEP-2a)和取代度為0.574的苯甲酰化LEP-2a(BLEP-2a)。FT-IR分析和13CNMR分析結(jié)果進(jìn)一步證實了乙酰化和苯甲?；揎棾晒?。基于13CNMR分析的結(jié)果，我們推測出→2）-α-D-Manp-(1→的C-3、C-4和C-6位，α-D-Manp-(1→的C-2、C-3、C-4和C-6位，→2，6)-α-D-

4、Manp-(1→的C-3和C-4位，→3，4)-α-D-Manp-（1→的C-2、C-4和C-6位，→3）-β-D-Galp-（1→的C-1、C-2、C-4和C-6位以及β-D-Galp-(1→的C-2、C-4和C-6位可能被乙?；糠秩〈?→3)-β-D-Galp-(1→的C-1位被完全苯甲?；?，→2)-α-D-Manp(1→、α-D-Manp-(1→和→2,6)-α-D-Manp-(1→的C-4位以及→2)-α-D-Manp-(1→

5、、α-D-Manp-(1→、→3，4)-α-D-Manp-(1→、→3)-β-D-Galp-(1→和β-D-Galp-(1→的C-6位可能被苯甲?；糠秩〈?br>　　通過腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)構(gòu)建糖尿病小鼠模型，并研究不同劑量LEP-2a、ALEP-2a和BLEP-2a對糖尿病小鼠的心血管保護(hù)作用。結(jié)果表明，LEP-2a及其衍生物具有心血管保護(hù)作用且存在劑量-效應(yīng)關(guān)系;與模型組相比，治療組小鼠心臟、腎臟和肝臟指數(shù)顯著降低，心臟

6、組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)和過氧化氫酶(CAT)活性顯著增加，丙二醛(MDA)水平顯著降低，血清中晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)、高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)和內(nèi)皮素1(ET-1)水平顯著降低，一氧化氮(NO)水平顯著增加;與同劑量的LEP-2a相比，ALEP-2a和BLEP-2a表現(xiàn)出更顯著的心血管保護(hù)作用。此外，組織病理學(xué)觀察顯示，治療組小鼠受損心肌結(jié)