蛹蟲草多糖的化學(xué)修飾及其體外生物活性研究.pdf

1、蛹蟲草多糖是蛹蟲草中含量最豐富的一種活性成分,具有保肝、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抗氧化和抗炎等多種藥理學(xué)活性。大量研究結(jié)果表明多糖經(jīng)化學(xué)修飾后可以顯著增強(qiáng)其生物活性。因此,開展關(guān)于蛹蟲草多糖的化學(xué)修飾與結(jié)構(gòu)改造等方面的研究,對開發(fā)利用我國的珍稀藥用菌資源具有重要的學(xué)術(shù)意義,而且對蛹蟲草天然藥品和保健品的開發(fā)也具有一定的指導(dǎo)意義。
　　本研究以蛹蟲草子實(shí)體為試驗(yàn)材料,考察原料質(zhì)量濃度、提取時(shí)間和超聲波功率三個因素對多糖提取率的影響,并采用響應(yīng)

2、曲面法優(yōu)化超聲波輔助提取蛹蟲草多糖的工藝條件,結(jié)果表明最優(yōu)工藝條件為:原料質(zhì)量濃度0.0232g/mL、提取時(shí)間39.8min和超聲波功率103W。在此條件下,多糖的提取率為8.15％。掃描電子顯微鏡(SEM)和傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)結(jié)果表明,超聲波輔助提取可以促使蛹蟲草多糖的溶出。
　　紫外光譜分析表明,蛹蟲草多糖中不含核酸,含有微量的蛋白質(zhì);通過DEAE-Cellulose-52陰離子交換柱層析獲得酸性多糖組分CMP

3、S,對CMPS進(jìn)行乙酰化、磷酸化和硫酸化修飾所得的多糖衍生物分別記為Ac-CMPS、P-CMPS和S-CMPS,它們的取代度分別為0.96、0.40和0.39,傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)分別呈現(xiàn)出乙?；⒘姿峄土蛩峄奶卣魑辗?。原子力顯微鏡(AFM)和掃描電子顯微鏡(SEM)結(jié)果表明,與CMPS相比,Ac-CMPS、P-CMPS和S-CMPS的表面形態(tài)均發(fā)生明顯變化。圓二色譜(CD)分析表明,CMPS經(jīng)乙?；?、磷酸化和硫酸化修

4、飾后,其衍生物的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化,在190～250nm范圍內(nèi)存在最大和最小吸收峰,呈現(xiàn)出負(fù)Cotton效應(yīng)。
　　體外抗氧化試驗(yàn)表明,蛹蟲草多糖及其衍生物的抗氧化活性與其濃度呈現(xiàn)正相關(guān)性。與CMPS相比,Ac-CMPS和S-CMPS清除DPPH自由基的活性分別提高了29.15%和11.91%,而P-CMPS清除DPPH自由基的活性降低了36.38%;Ac-CMPS和S-CMPS的總還原能力略有升高,而P-CMPS的總還原能力略

5、有降低;P-CMPS和S-CMPS螯合Fe2+的能力分別提高了37.67%和47.17%,而Ac-CMPS螯合Fe2+的能力降低了1.95%;P-CMPS和S-CMPS清除羥自由基的活性分別提高了17.02%和28.10%,而Ac-CMPS清除羥自由基的活性降低了48.87%。
　　體外抗腫瘤試驗(yàn)表明,蛹蟲草多糖及其衍生物對肝癌細(xì)胞HepG2和胃癌細(xì)胞SGC7901增殖的抑制作用與其濃度呈現(xiàn)正量效關(guān)系。與CMPS相比,P-CMPS