安息香總香脂酸的提取純化工藝及其腦保護(hù)作用研究.pdf

1、目的:研究安息香中主要成分總香脂酸的提取純化工藝及其腦保護(hù)作用。
　　方法：①總香脂酸評(píng)價(jià)方法的建立以重量法（藥典法）為參照，建立紫外分光光度法(UV)測定安息香總香脂酸含量；以高效液相色譜法（HPLC）測定總香脂酸中苯甲酸含量。
　?、诳傁阒崽崛」に囈钥傁阒岷捅郊姿徂D(zhuǎn)移率為指標(biāo)，在預(yù)試基礎(chǔ)上,采用溶劑提取法，對(duì)不同提取溶劑、不同提取方法進(jìn)行考察后進(jìn)一步對(duì)提取溶劑濃度、用量、提取時(shí)間三個(gè)主要影響因素進(jìn)行正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，以確

2、定安息香總香脂酸最佳提取工藝的各項(xiàng)參數(shù)。
　　③總香脂酸純化工藝以總香脂酸、苯甲酸吸附量和洗脫率為指標(biāo)，對(duì)樹脂種類、上樣液pH、濃度、上樣量、上樣流速、解吸附劑用量、洗脫劑體積分?jǐn)?shù)及用量進(jìn)行考察，以確定總香脂酸最佳純化工藝參數(shù)。
　?、芸傁阒崮X保護(hù)作用研究選用小鼠急性腦缺血模型、小鼠常壓耐缺氧模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，考察總香脂酸對(duì)小鼠存活時(shí)間的影響。
　　結(jié)果：①總香脂酸評(píng)價(jià)方法的建立 UV法檢測波長為223nm，回歸方程為A

3、=66.750C+0.0377(r=0.9991)； HPLC法回歸方程為 Y=5839.9X－259.06（r=0.9994）。UV法與重量法相比較，P=0.437（＞0.05），即認(rèn)為兩種方法測定結(jié)果無顯著性差異，提示UV法可用于測定安息香總香脂酸含量。
　?、诳傁阒崽崛」に囎罴烟崛」に噮?shù)為：氫氧化鈉濃度為0.75mol/l、溶媒用量為15倍、提取時(shí)間為1h，提取1次。
　?、劭傁阒峒兓に囎罴鸭兓に噮?shù)為：上樣

4、液pH為12、上樣液濃度為0.02g/ml、上樣量8BV、上樣流速為2BV/h、3BV去離子水除雜、2BV的稀鹽酸解吸附、6BV的95％乙醇洗脫。純化后，總香脂酸平均純度達(dá)73.49%，純化倍數(shù)達(dá)2.78；苯甲酸平均純度達(dá)63.97%，純化倍數(shù)達(dá)2.95。
　?、芸傁阒崮X保護(hù)作用研究與溶媒對(duì)照組比較，總香脂酸組、安息香組、冰片組對(duì)抗小鼠急性腦缺血、缺氧作用均不明顯，但一定程度上延長了小鼠存活時(shí)間；而總香脂酸-冰片配伍組、安息香-

5、冰片配伍組對(duì)抗小鼠急性腦缺血、缺氧作用明顯，能夠顯著延長小鼠存活時(shí)間；總香脂酸組與安息香組比較、總香脂酸-冰片配伍組與安息香-冰片配伍組比較，P值均大于0.05，表明總香脂酸與安息香生藥在藥效學(xué)上無顯著性差異，但總香脂酸對(duì)小鼠存活時(shí)間有延長趨勢，與課題組前期研究結(jié)果一致；上述結(jié)果表明總香脂酸為安息香有效成分，且進(jìn)一步驗(yàn)證了冰片的“引藥入腦、佐使有功”的作用。
　　結(jié)論：①UV法與重量法對(duì)總香脂酸含量測定的結(jié)果無顯著性差異，但重量法

6、步驟繁瑣、周期長而UV法操作步驟減少、周期縮短，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于安息香總香脂酸的含量測定。
　?、谔崛」に嚳茖W(xué)合理，穩(wěn)定可靠，提取效率高；717型陰離子交換樹脂對(duì)安息香總香脂酸的純化效果好，周期短，成本低，為后期開展總香脂酸腦保護(hù)作用的研究奠定了基礎(chǔ)。
　?、劭傁阒彷^安息香生藥而言，藥效學(xué)上雖然無顯著性差異，但在一定程度上也延長了小鼠存活時(shí)間，提示總香脂酸可能為安息香有效成分，且進(jìn)一步驗(yàn)證了冰片“引藥入腦、佐使有功