淫羊藿苷對(duì)大鼠快速擴(kuò)弓及保持過程中腭中縫骨形成的影響.pdf

1、快速擴(kuò)弓是正畸醫(yī)生常用的臨床技術(shù)，被用于牙列擁擠、牙弓狹窄及前牙反猞病例的矯治。在快速擴(kuò)弓過程中，腭中縫在矯形力的作用下被打開，成骨過程被激活，新骨不斷在骨縫邊緣沉積，最終使上頜骨在新的位置上穩(wěn)定下來。然而，盡管快速擴(kuò)弓的療效已經(jīng)被絕大多數(shù)正畸醫(yī)生所認(rèn)可，但快速擴(kuò)弓過程中仍有諸多問題出現(xiàn)，如牙根吸收、牙齦退縮、擴(kuò)弓量不足、不對(duì)稱擴(kuò)弓以及擴(kuò)弓后復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)是擴(kuò)弓治療后最普遍的并發(fā)癥之一。在快速擴(kuò)弓過程中被打開的骨縫無法在擴(kuò)弓期和保持期內(nèi)形成

2、充足的骨質(zhì)被認(rèn)為是導(dǎo)致復(fù)發(fā)的重要原因之一。因此在上頜快速擴(kuò)弓治療過程中，加速腭中縫骨質(zhì)的形成和沉積是保證快速擴(kuò)弓效果最重要的環(huán)節(jié)。為此各國學(xué)者嘗試了若干方法促進(jìn)腭中縫新骨的形成，這些方法包括二磷酸鹽、低能激光、轉(zhuǎn)化生長因子等。然而這些方法不但在操作方法上難以實(shí)施，而且花費(fèi)較高，不易被患者所接受，故難以大規(guī)模用于臨床。
　　近幾年來，傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)開始逐步受到重視。作為中華民族的寶貴遺產(chǎn)，古老的傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)不僅受到國內(nèi)醫(yī)生和患者的青睞，

3、也在逐步吸引著國際學(xué)者的目光。在國內(nèi)外學(xué)者的不斷努力下，越來越多的的中醫(yī)藥被開發(fā)和應(yīng)用。以現(xiàn)代分子生物學(xué)手段研究古老的中醫(yī)藥學(xué)成為當(dāng)前的熱門課題。在本試驗(yàn)中我們選取補(bǔ)腎類中藥淫羊藿苷，通過建立大鼠快速擴(kuò)弓模型，研究補(bǔ)腎類中藥淫羊藿苷對(duì)大鼠快速擴(kuò)弓及保持過程中腭中縫骨形成的影響，從而為增強(qiáng)擴(kuò)弓效果，減少術(shù)后復(fù)發(fā)提供一條新思路。
　　目的:
　　建立大鼠快速擴(kuò)弓模型，對(duì)建立快速擴(kuò)弓模型的大鼠灌服淫羊藿苷混懸液后觀察并分析大鼠腭中

4、縫的組織形態(tài)，明確淫羊藿苷對(duì)大鼠快速擴(kuò)弓及保持過程中腭中縫骨形成的影響，為利用傳統(tǒng)中藥增強(qiáng)快速擴(kuò)弓效果提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　36只雄性Wistar大鼠（6周齡，150+10g）被選取后，統(tǒng)一編號(hào)并隨機(jī)分為三組。其中A組被設(shè)置為對(duì)照組，不進(jìn)行雙眼圈簧擴(kuò)弓裝置的安裝。B、C兩組大鼠經(jīng)水合氯醛麻醉以后，以藻酸鹽制取口腔印模并用超硬石膏制作模型。以模型為基礎(chǔ)，用細(xì)絲鉗彎制雙眼圈簧裝置，并調(diào)整其力值使其就位后產(chǎn)生100g機(jī)械

5、擴(kuò)張力。再次麻醉大鼠后，把雙眼圈簧裝置用針持固定于大鼠上頜兩側(cè)第一、二磨牙之間的鄰間隙內(nèi)并以光敏樹脂固定。7天后各組隨機(jī)處死4只大鼠，剩余大鼠麻醉后以光固化樹脂固定雙眼圈簧的彈性加力部位，進(jìn)入保持期。剩余大鼠于第14天、21天分別處死，制取上頜標(biāo)本。所有上頜標(biāo)本取下后立即測(cè)量并記錄上頜左右兩側(cè)第一磨牙中央窩之間的距離。在擴(kuò)弓及保持過程中，C組大鼠每日灌服20mg/kg的淫羊藿苷混懸液，A、B兩組大鼠根據(jù)體重給以同等量的溶劑（0.5％羧甲

6、基纖維素鈉溶液）。標(biāo)本脫鈣后行HE及免疫組織化學(xué)染色觀察腭中縫骨組織改建及成骨相關(guān)因子的表達(dá)狀況。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠上頜快速擴(kuò)弓以及保持過程中腭中縫組織的形態(tài)變化
　　觀察HE切片可見，腭中縫中央是由一條狹長的纖維樣細(xì)胞帶構(gòu)成，富含纖維、成纖維細(xì)胞、骨和軟骨樣前體細(xì)胞，細(xì)胞呈密集分布，體積較周邊細(xì)胞小，可以清晰地看到胞核，胞質(zhì)少。其外側(cè)為軟骨細(xì)胞層，細(xì)胞體積大，呈卵圓形，胞質(zhì)豐富且染色淺，細(xì)胞核大而明顯，呈橢圓

7、形。最外側(cè)為兩側(cè)硬骨板的邊緣，可見骨髓腔。
　　在快速擴(kuò)弓過程中，大鼠腭中縫被擴(kuò)寬，腭中縫中央的前體細(xì)胞帶被撕裂，正常的細(xì)胞和纖維的分布位置被打亂。在部分切片中可以觀察到炎癥反應(yīng)和新生血管的形成。在兩側(cè)硬骨板的邊緣可以看到大量的成骨細(xì)胞以及新生的骨組織。進(jìn)入保持期以后仍能看到部分新生血管，但腭中縫的炎癥反應(yīng)減輕，腭中縫中央的纖維樣組織和細(xì)胞趨于回到原來的正常排列。
　　2.上頜寬度度的變化
　　肉眼觀察，B、C兩組大鼠

8、腭中縫被擴(kuò)開，上頜寬度增大。測(cè)量數(shù)據(jù)顯示，與A組大鼠相比，B、C兩組大鼠在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上頜寬度均明顯增寬(p＜0.05)。然而，B、C兩組之間差異無顯著性(p＞0.05）。
　　3.成骨細(xì)胞的數(shù)目變化
　　與A組相比，C組大鼠成骨細(xì)胞的數(shù)目在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯升高，其差異具有顯著性(p＜0.05）。與A組相比，B組大鼠的成骨細(xì)胞數(shù)目在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均升高，然而，僅在第7天時(shí)其差異具有顯著性(p＜0.05）。
　　4.BMP-2

9、的表達(dá)情況
　　與A組相比，B、C兩組BMP-2的表達(dá)量在第7天和第14天時(shí)明顯升高，其差異具有顯著性(p＜0.05)，且C組大鼠的表達(dá)量與B組相比明顯升高(p＜0.05)。然而，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示A、B、C三組之間BMP-2的表達(dá)量在第21天時(shí)無明顯差異(p＞0.05)。
　　5.BMP-4的表達(dá)情況
　　與A組相比，B、C兩組BMP-4的表達(dá)量在第7、14、21天均顯著上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。C組BMP

10、-4的表達(dá)量在各個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)均明顯高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.在大鼠上頜快速擴(kuò)弓及保持過程中，機(jī)械刺激可以激發(fā)大鼠腭中縫BMP-2及BMP-4的表達(dá)，隨保持期的延長這種作用逐漸減弱并消失。
　　2.在機(jī)械擴(kuò)張力的作用下，淫羊藿苷可以促進(jìn)大鼠腭中縫的成骨分化以及BMP-2、BMP-4的表達(dá)。
　　3.淫羊藿苷能夠促進(jìn)上頜快速擴(kuò)弓及保持過程中腭中縫的骨質(zhì)改建，加速新骨的形成，有利于擴(kuò)