慢性飲酒對大鼠大腦中動脈平滑肌細胞BK通道電流的影響及維生素C的保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究慢性飲酒對大鼠大腦中動脈平滑肌細胞(middle cerebrAlartery smooth muscle cell, MCASMC)大電導鈣激活鉀通道(high-conductance Ca2+-activated K+channel, BK通道)電流的影響及維生素C的保護作用。
   方法:備動物模型,將健康雄性SD大鼠隨機分為三組:正常對照組,飲酒組和維生素C組。對照組大鼠自由飲水;飲酒組大鼠前12周按2~4g/

2、(kg·d)的濃度自由飲酒,后8周自由飲用含20%(V/V)酒精的水,共飲酒20周;維生素C組是在飲酒組大鼠所飲酒水的基礎上加入0.05%(W/V)的維生素C片,溶解后飲用20周。急性酶解法分離大鼠MCASMC,利用全細胞膜片鉗技術記錄BK通道的電流,觀察慢性飲酒對大鼠大腦中動脈 BK通道電流的影響及維生素C的干預作用。
   結果:兩步酶解法分離得到大鼠MCASMC,細胞多呈梭形,膜表面光滑,輪廓清晰,其外形在對照組、飲酒組和

3、維生素C組之間無顯著差異。電壓鉗模式下測定三組大鼠MCASMC膜電容,分別為15.33±1.36 pF、13.50±1.96 pF和13.44±3.20pF,各組之間均無顯著差異(P>0.05)。階躍方波脈沖方案,鉗制電位-80mV,從-60mV 起以10mV階躍除極至+80mV,測試500ms,采樣間隔5s,采樣頻率5kHz。繪制電流-電壓關系曲線,結果證實BK通道電流呈電壓依賴性,從+20mV開始呈明顯的外向整流特性。記錄BK電流,

4、測試比較不同膜電位下大鼠BK通道的電流情況,從+40mV開始除極至+80mV,飲酒組與對照組相比,大鼠MCASMC BK通道電流均顯著下降;從-60mV至+80mV,維生素C組與飲酒組相比電流均顯著升高,此外在+10mV和+30mV,維生素C組比對照組也有顯著升高(P<0.05)。在單電壓60mV脈沖刺激下得到大鼠MCASMC的BK通道電流值,飲酒組較對照組顯著降低(5.271.27pA/pFvs17.54±±7.77pA/pF,P<0

5、.01),維生素C組較飲酒組顯著升高(14.446.36pA/pFvs5.27±±1.27pA/pF,P<0.05)。采用斜坡脈沖方案,從-50mV連續(xù)除極至+100mV時電流達最高,記錄并比較峰值電流,飲酒組較對照組顯著降低(9.911.94pA/pFvs30.18±±10.67pA/pF,P<0.01),維生素C組較飲酒組顯著升高(24.198.72pA/pFvs9.911.94pA/pF,P<0.05)。±±
   結論:

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