HMGB1對(duì)高糖誘導(dǎo)的小鼠心臟成纖維細(xì)胞TGF-β1、COLLAGEN Ⅰ表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察高糖對(duì)小鼠心臟成纖維細(xì)胞HMGB1表達(dá)的影響，及抑制HMGB1后對(duì)高糖引起的小鼠心臟成纖維細(xì)胞TGF-β1、collagenⅠ表達(dá)的影響。
　　 方法:(1)酶消化法分離小鼠心臟成纖維細(xì)胞，差速貼壁法去除心肌細(xì)胞。波形蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定成纖維細(xì)胞。(2)高糖(25mmol/l)誘導(dǎo)細(xì)胞。(3)將HMGBlsiRNAs和陰性對(duì)照通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑RNAiMAX轉(zhuǎn)染到心臟成纖維細(xì)胞中。(4)qRT-PCR檢測細(xì)胞HM

2、GB1、TGF-β1、collagenⅠmRNA表達(dá)，Westernblot檢測HMGB1蛋白表達(dá)，ELISA檢測細(xì)胞上清中的TGF-β1、collagenⅠ蛋白濃度。
　　 結(jié)果:(1)使用酶消化法和差速貼壁法獲得的高純度細(xì)胞符合成纖維細(xì)胞的形態(tài)特征并且波形蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色陽性(2)高糖誘導(dǎo)6小時(shí)后成纖維細(xì)胞的HMGB1表達(dá)即上升。高糖導(dǎo)致TGF-β1和collagenⅠ的表達(dá)上調(diào)。抑制HMGB1的表達(dá)（基因沉默）能夠抑制