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文檔簡介
1、目的:通過觀察桂枝茯苓丸對PID模型大鼠不同階段炎性細胞因子及粘連相關免疫分子變化的影響,為指導臨床用藥時間段及用藥方法的選擇提供理論依據(jù)。
方法:選用SPF級雌性未孕SD大鼠建立PID模型,采用機械性損傷子宮內膜加細菌感染法,將198只大鼠隨機分為8組:假手術組及空白組;模型組、治療組(桂枝茯苓丸高、中、低劑量組)、對照組(金剛藤組及甲硝唑組)。藥物分別干預7天、14天、21天后,隨機抽取不同時間段各組大鼠,稱重,采取大鼠血
2、液;摘取子宮組織和卵巢組織,肉眼觀察后進行稱重,分別計算兩者的指數(shù);不同時間段各組大鼠血清中的前炎性細胞因子白介素-8(IL-8)和抗炎性細胞因子白介素-10(IL-10)都通過運用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)來測定;在光學顯微鏡下觀察子宮組織不同時間段的病理變化;子宮組織中不同時間段免疫分子基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)和血管內皮生長因子(VEGF)的陽性表達使用免疫組化法(S-P法)進行檢測。
結果:
1.模
3、型大鼠出現(xiàn)了類似寒濕瘀阻證候的表現(xiàn),與空白組、假手術組比較有差異,不同藥物干預后,各模型組大鼠在不同時間段的一般情況均有所改善。
2.模型組與空白組、假手術組比較,體重增加,藥物干預后各組在不同時間段的體重有所降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),以第21天桂枝茯苓丸高劑量組顯著(P<0.05),不同時間段各組內比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
3.模型組的子宮指數(shù)、卵巢指數(shù)均有所降低,與空白組及假手術組比較有統(tǒng)
4、計學意義(P<0.05);與模型組相比較,藥物干預后在第7、14、21天的子宮指數(shù)、卵巢指數(shù)均有不同程度的升高,其變化均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。各組內比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
4.模型組的IL-8水平升高、IL-10水平降低,兩者關系呈負相關發(fā)展。與空白組及假手術組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05),隨著時間的延長,在不同藥物干預后,其IL-8呈降低趨勢,IL-10呈升高趨勢,不同時間段各用藥組最終恢復,接近于正
5、常水平,尤以桂枝茯苓丸中劑量組較為明顯(P<0.05)。
5.不同時間段模型組的大鼠子宮內膜均有異常變化。主要表現(xiàn)為:大部分上皮細胞在第7天時有壞死脫落,淋巴細胞、單核細胞等炎性細胞的浸潤,子宮內膜充血,有明顯擴張的血管;第14天時子宮內膜結構不清,排列紊亂,結締組織增生,宮腔大量分泌物;第21天時肌纖維紋理紊亂,部分腺體壞死并被纖維結締組織填充,宮腔內可見大量的分泌物,用藥后各組表現(xiàn)均有改善。
6.不同時間段各模型
6、組VEGF表達呈逐漸升高趨勢,與空白組、假手術組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。藥物干預后,與模型組比較,不同時間段VEGF均有所降低,但第7天時桂枝茯苓丸中劑量組、金剛藤組明顯(P<0.05);桂枝茯苓丸中劑量組在第14天、21天時最顯著(P<0.01);藥物干預后不同時間段各組內比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
7.不同時間段各模型組的MMP-9表達呈逐漸升高的趨向,與空白組及假手術組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05);
7、與模型組比較,藥物干預后,除第21天的金剛藤組、甲硝唑組外,其余各用藥組MMP-9均有一定程度的降低(P<0.05);桂枝茯苓丸高劑量組在第7天時降低MMP-9的表達最明顯(P<0.01);而桂枝茯苓丸中劑量組在第14天、21時天降低MMP-9最顯著(P<0.01);不同時間段用藥后兩者的表達在各組組內比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
結論:
1.桂枝茯苓丸通過溫經(jīng)活血化瘀法,除改善不同時間段大鼠的一般情況、體重及
8、子宮、卵巢指數(shù)等外,還可改善子宮組織的病理形態(tài),其中桂枝茯苓丸高劑量組作用顯著??赡芡ㄟ^調節(jié)大鼠體內功能、代謝的紊亂狀態(tài)達到治療效果。
2.第7天時PID模型大鼠尚處于急性發(fā)作期,清熱解毒法及抗生素治療明顯;第14天后進入慢性期,桂枝茯苓丸通過溫經(jīng)活血化瘀法可以有效的調節(jié)慢性期IL-8、IL-10的發(fā)展趨勢,可能通過升高PID慢性期抗炎性細胞因子、降低前炎性細胞因子的表達來治療PID,進而降低PID進一步發(fā)展或惡化的可能性。<
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