亞硒酸鈉脅迫下斑點(diǎn)叉尾鮰服組織差異蛋白質(zhì)組研究.pdf

1、本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名( 手寫) ： 簽字日期：c 沁1 1 年‘月／歹日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解直昌太堂有關(guān)保留、使

2、用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)直昌太堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊( 光盤版) 電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。( 保密的學(xué)位論文在解密

3、后適用本授權(quán)書)學(xué)位敝儲(chǔ)簽名c 手瓢辮繹簽字日期穢叭年6 月《日??吵孝簽字日期：弘w 年‘月哆日激、加強(qiáng)機(jī)體免疫力、開展亞硒酸鈉對(duì)斑點(diǎn)察的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)上開展腦組織差異蛋白質(zhì)組的初步研究。第一部分開展亞硒酸鈉對(duì)斑點(diǎn)叉尾鲴幼魚的急性毒性試驗(yàn)，結(jié)果表明：試驗(yàn)組斑點(diǎn)叉尾鲴易受驚擾，身體失去平衡，或是側(cè)游、或是仰游、或是翻滾。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得到亞硒酸鈉對(duì)鲴魚9 6 h 半致死濃度為3 5 ．5 9 m e , ／L 。第二部分依據(jù)急性毒性試驗(yàn)分析結(jié)果

4、，取經(jīng)過半致死濃度3 5 ．5 9 m g ／L 浸泡9 6 h 后還存活的魚小腦進(jìn)行石蠟組織切片和電鏡觀察。組織切片結(jié)果表明：對(duì)照組小腦皮質(zhì)顆粒層細(xì)胞排列均勻，顆粒層結(jié)構(gòu)完整，呈正常的圓形；實(shí)驗(yàn)組小腦皮質(zhì)顆粒層區(qū)域疏松、水腫，呈現(xiàn)空網(wǎng)狀，顆粒細(xì)胞崩解消失，部分細(xì)胞失去正常的圓形，出現(xiàn)菱角，呈三角形或者不規(guī)則形狀。電鏡結(jié)果表明：對(duì)照組小腦皮質(zhì)細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器，線粒體豐富，嵴板排列規(guī)整，髓鞘結(jié)構(gòu)完整；實(shí)驗(yàn)組小腦皮質(zhì)細(xì)胞質(zhì)水腫，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)

5、細(xì)胞器明顯減少，線粒體水腫，雙層膜結(jié)構(gòu)坍塌，嵴溶解消失，有的線粒體呈空泡狀，僅見線粒體的輪廓。病理觀察表明亞硒酸鈉對(duì)斑點(diǎn)叉尾鲴腦組織有一定的毒性損傷。第三部分同樣取經(jīng)過半致死濃度3 5 ．5 9 m e C L 浸泡9 6 h 后還存活的魚腦組織進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)研究。首先通過優(yōu)化雙向凝膠電泳各方面條件后建立一套適合于斑點(diǎn)叉尾鲴腦組織雙向電泳體系，分析雙向電泳圖譜找出差異蛋白點(diǎn)。結(jié)果表明：對(duì)照組分離出蛋白質(zhì)點(diǎn)1 0 2 4 ±2

6、5 個(gè)，實(shí)驗(yàn)組為9 9 8 ±2 0 個(gè)，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組共有9 個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)。將差異蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行生物質(zhì)譜分析鑒定，并通過對(duì)N C B I n r 和E S T 數(shù)據(jù)庫檢索得到9 種蛋白質(zhì)，其中3 種蛋白質(zhì)為p e r o x i r e d o x i n - 2 、a l d o s e r e d u c t a s e 和c a r b o n i ca n h y d r a s c ，有望作為研究斑點(diǎn)叉尾鲴腦