不同碳源條件下草菇（Volvariella volvacea）葡聚糖內切酶誘導表達的分析.pdf

1、草菇在生長發(fā)育過程中會合成和分泌多種纖維素降解酶,以降解和利用棉籽殼、木屑、稻草等纖維素類培養(yǎng)料,但因為纖維素大分子不可能直接進入菌絲體內,因此菌絲合成的纖維素降解酶必須分泌到菌絲體外才能發(fā)揮作用.前期研究表明 V.volvacea可以產(chǎn)生三種纖維素酶即內切型纖維素酶即葡聚糖內切酶(EC3.2.1.4),外切型纖維素酶(EC3.2.1.91)和β-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21)等多種成分.本實驗選擇了葡聚糖內切酶EG1作為研究對象,

2、研究了碳源對草菇葡聚糖內切酶合成的誘導調控機理. 真菌纖維素酶是一種誘導酶,碳源同時也是主要的誘導物來源.實驗中利用了western blotting技術檢測了不同碳源誘導下EG1的分泌,結果發(fā)現(xiàn)草菇產(chǎn)纖維素酶的誘導源很寬,α-乳糖、纖維二糖、羧甲基纖維素、微晶纖維素、麩皮等均能誘導草菇產(chǎn)生EG1;在含有微晶纖維素的液體培養(yǎng)基中生長10天,EG1在草菇菌絲中有高效表達;在天然稻草為基質的固體栽培料生長時,草菇EG1的表達和草菇菌

3、絲生長與出菇相對應,分別在菌絲生長期、分化期、菇體成熟期EG1的分泌量達到最大. 為了更深入的研究碳源對EG1的誘導表達,我們重點研究以α-乳糖、纖維二糖、山梨糖為碳源誘導草菇EG1的分泌,結果發(fā)現(xiàn)α-乳糖、纖維二糖均能誘導EG1的高效表達,而山梨糖卻不能;又對不同濃度的α-乳糖和纖維二糖誘導24小時進行研究,結果發(fā)現(xiàn)在低濃度時也均能誘導EG1的表達,α-乳糖在濃度為0.5％誘導表達量最大,纖維二糖則是在濃度為2％誘導表達量最大