藤珠胃康顆粒的藥學(xué)研究.pdf

1、目的：優(yōu)選藤珠胃康顆粒提取、成型工藝；制訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案；初步穩(wěn)定性研究以及安全性評(píng)價(jià)和初步藥效學(xué)試驗(yàn)。
　　方法：提取工藝優(yōu)化：處方中藤梨根、黃精、白術(shù)及三棱四味藥采用水提取，珠子參采用醇提取，分別采用L9（34）正交試驗(yàn)，以主要有效成分、總部位和出膏率為考察指標(biāo)，優(yōu)化提取工藝；制劑成型工藝優(yōu)化：采用單因素試驗(yàn)，以成型率、吸濕率、溶化性為指標(biāo)，從輔料種類、輔料配比等方面進(jìn)行成型工藝考察；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案：采用TLC法，建立了藤珠胃康顆

2、粒中五種藥材的鑒別方法；參照藥典通則的相關(guān)內(nèi)容，進(jìn)行顆粒劑制劑通則相關(guān)項(xiàng)目的檢查；采用HPLC法，以Hypersil GOLD C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）為色譜柱，以乙腈-0.2％磷酸水溶液為流動(dòng)相，梯度洗脫，檢測(cè)波長為203 nm，建立藤珠胃康顆粒中幾種皂苷類成分的含量測(cè)定方法；初步穩(wěn)定性考察：采用室溫留樣法進(jìn)行藤珠胃康顆粒的初步穩(wěn)定性研究；初步安全性評(píng)價(jià)：采用急性毒性試驗(yàn)和長期毒性試驗(yàn)進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。通過對(duì)小鼠單

3、次給藥毒性試驗(yàn)，一天內(nèi)小鼠給藥2次，測(cè)定其最大給藥量，通過對(duì)大鼠連續(xù)重復(fù)給藥的長期毒性試驗(yàn)，觀察大鼠各項(xiàng)指標(biāo)及其恢復(fù)情況；初步藥效學(xué)試驗(yàn)：用藤珠胃康顆粒不同濃度的含藥血清作用于小鼠胃癌MFC細(xì)胞，采用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)，采用流式細(xì)胞儀測(cè)定其對(duì)細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡作用。
　　結(jié)果：提取工藝優(yōu)化：珠子參優(yōu)選的提取工藝為50%乙醇，提取一次，提取時(shí)間2 h；藤梨根等其余四味藥優(yōu)選的提取工藝為10倍量水，提取3次，每次1 h。以上優(yōu)選

4、提取工藝均經(jīng)過放大驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果表明優(yōu)化的提取工藝穩(wěn)定可行；制劑成型工藝：優(yōu)化的成型工藝為干膏粉：乳糖：糊精=1:1:0.5，此條件下顆粒成型性、溶化性、吸濕性等均符合要求；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案：建立的五味藥材的薄層鑒別方法中，在各供試品色譜中，在與對(duì)照相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，且陰性對(duì)照無干擾。檢查項(xiàng)中，均符合顆粒相關(guān)通則的要求。人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Ro和竹節(jié)參皂苷Ⅳa分別在0.1608～1.608μg、0.1088～2

5、.176μg、0.289～8.67μg和0.176～5.286μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r≥0.9999），加樣回收率分別為99.07%、101.92%、99.76%、99.20%，RSD值分別為2.84%、2.07%、0.33%、2.40%；穩(wěn)定性考察：考察了12個(gè)月三批中試的藤珠胃康顆粒，經(jīng)檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，表明12個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定性良好；初步安全性評(píng)價(jià)：單次給藥毒性試驗(yàn)中，小鼠未有死亡，未測(cè)出LD50，其受試藥物量為臨床擬

6、用量的400倍，此劑量下未檢測(cè)到有毒性反應(yīng)。長期毒性試驗(yàn)中，與空白對(duì)照組比較，不同劑量給藥組的一般體征、血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)、病理切片等均無明顯差異（P>0.05），說明藤珠胃康顆粒按臨床擬用劑量服用具安全性；初步藥效學(xué)研究：不同濃度的藤珠胃康顆粒含藥血清作用于小鼠胃癌MFC細(xì)胞，可降低細(xì)胞形態(tài)延展性，使細(xì)胞生長趨于遲緩；與空白對(duì)照組比較，中、高劑量組對(duì)細(xì)胞增殖抑制率具有顯著性作用（P<0.05），給藥劑量范圍內(nèi)，隨著劑量增加，細(xì)胞