Bt工程菌HD8Ea2的構(gòu)建及Cry8Ea2蛋白對(duì)華北大黑鰓金龜中腸微生物的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、華北大黑鰓金龜(Holotrichiaoblita)屬于鞘翅目金龜甲總科(Scarabaeoidae),其幼蟲對(duì)農(nóng)、林、牧草等都有為害,在我分布廣泛,種群數(shù)量大,危害嚴(yán)重。
　　 蘇云金桿菌(Bacillusthuringiensis,簡稱Bt)是革蘭氏陽性細(xì)菌(G+),在其生活史中能產(chǎn)生多種殺蟲晶體蛋白,是目前應(yīng)用最為廣泛而有效的一種生物殺蟲劑。本研究從全國各地的土樣中篩選得到含cry8類基因的野生型菌株GW11,該菌株對(duì)華北

2、大黑鰓金龜具有殺蟲活性,LC50為6.43×106cell/mL。Cry8Ea2蛋白是一種新型蘇云金桿菌殺蟲晶體蛋白。本研究通過穿梭載體pSXY422b將cry8Ea2導(dǎo)入Bt無晶體突變菌株HD73-(cry-)中,獲得工程菌HD8Ea2。Cry8Ea2蛋白在工程菌中獲得表達(dá)。通過分子篩層析,成功獲得純化的130kDa活性毒蛋白。用改進(jìn)的生物活性測(cè)定方法進(jìn)行Cry8Ea2蛋白對(duì)華北大黑鰓金龜一齡幼蟲的殺蟲活性測(cè)定,LC50為0.2679

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