利用偽無(wú)菌小鼠研究腸道菌群在茶多酚減肥中的作用.pdf

1、腸道菌群與宿主肥胖密切相關(guān)，宿主肥胖又會(huì)引起低度慢性炎癥、引發(fā)高血壓、高血脂等相關(guān)心腦血管疾病。偽無(wú)菌小鼠動(dòng)物模型是研究腸道菌群與肥胖及其他相關(guān)疾病關(guān)系的有利“工具”。20只8周齡C57BL/6J雄性小鼠給予抗生素混合物飲水，剔除大部分腸道微生物模擬無(wú)菌動(dòng)物。隨機(jī)分成兩組：對(duì)照組（pgf CK）和高脂組（pgf HF），分別飼喂常規(guī)純化飼料與高脂純化飼料8周。以20只SPF級(jí)小鼠作對(duì)照，分為spf CK和spf HF組，分別飼喂常規(guī)純化

2、飼料與高脂純化飼料8周。常規(guī)方法測(cè)定小鼠體重、血清中血糖、血脂指標(biāo)、胰島素水平，HE染色做小鼠附睪脂肪切片，利用Image-Pro Plus6.0圖像處理軟件計(jì)算脂肪細(xì)胞面積、長(zhǎng)徑、短徑。
　　結(jié)果表明，與spf HF組小鼠相比，pgfHF組偽無(wú)菌小鼠的體重、脂肪墊、腎周脂重量顯著低于spf HF組小鼠（P<0.001）；胰島素水平、脂肪細(xì)胞大小也顯著低于spf HF組小鼠（P<0.01），pgfHF組偽無(wú)菌小鼠出現(xiàn)低體重低脂肪的

3、表型，與無(wú)菌小鼠動(dòng)物模型特征一致。因此本課題采用抗生素處理建立偽無(wú)菌小鼠動(dòng)物模型來(lái)預(yù)示無(wú)菌小鼠試驗(yàn)的結(jié)果，進(jìn)一步研究偽無(wú)菌小鼠和SPF小鼠對(duì)茶多酚減肥作用的響應(yīng)差異。
　　利用茶多酚飼喂肥胖的SPF級(jí)小鼠和偽無(wú)菌小鼠，常規(guī)方法測(cè)定小鼠體重、血糖。采集小鼠的血清用放射性免疫技術(shù)和酶聯(lián)免疫法測(cè)定血脂指標(biāo)、胰島素水平、炎癥水平；HE染色做小鼠附睪脂肪切片，利用Image-Pro Plus6.0圖像處理軟件計(jì)算脂肪細(xì)胞面積、長(zhǎng)徑、短徑。<

4、br>　　結(jié)果顯示，0.8％茶多酚對(duì)SPF與偽無(wú)菌小鼠體重分別減輕7.7%和7.6%，1.6%茶多酚可減輕SPF與偽無(wú)菌小鼠體重分別達(dá)8.6%和10.8%。茶多酚干預(yù)后，肥胖的SPF小鼠與偽無(wú)菌小鼠空腹血糖極顯著下降（P<0.01），SPF級(jí)肥胖小鼠總膽固醇降低7.7%、甘油三酯含量降低26.51%，高密度脂蛋白膽固醇升高10.08%，而茶多酚對(duì)偽無(wú)菌小鼠甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇含量無(wú)顯著影響。茶多酚顯著抑制SPF級(jí)小鼠的脂肪細(xì)胞膨

5、大（P<0.01），脂肪組織形態(tài)接近于對(duì)照組。偽無(wú)菌小鼠的脂肪細(xì)胞面積、長(zhǎng)徑、短徑均極顯著大于SPF級(jí)小鼠（P<0.001），脂肪細(xì)胞膨大現(xiàn)象未得到改善。
　　高脂飲食誘導(dǎo)SPF與偽無(wú)菌小鼠體內(nèi)促炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α水平升高、抗炎癥因子 IL-10水平下降；茶多酚干預(yù)后，SPF與偽無(wú)菌小鼠體內(nèi)炎癥得到改善，與茶多酚有劑量依賴關(guān)系。炎癥因子 IL-1、IL-6、TNF-α水平下降、IL-10水平上升；并且偽無(wú)菌小鼠

6、體內(nèi)IL-1、IL-6水平略低于SPF小鼠，IL-10水平較SPF小鼠略高。
　　高脂飲食后，SPF小鼠腸道厚壁菌門、放線菌門、變形菌門的細(xì)菌豐度顯著高于spf CK組。茶多酚干預(yù)后，放線菌門細(xì)菌豐度下降，厚壁菌門/擬桿菌門的細(xì)菌豐度比值降低。抗生素處理后，偽無(wú)菌小鼠腸道菌群多樣性降低，并且大量定植了疣微菌門的細(xì)菌，高脂飲食還引起腸桿菌、普氏菌的豐度提高、乳桿菌豐度下降等；經(jīng)過(guò)茶多酚調(diào)控，菌群結(jié)構(gòu)得到調(diào)整，阿克曼菌、乳桿菌豐度上升

7、，腸桿菌、普氏菌豐度下降甚至消失。
　　本研究結(jié)果表明，茶多酚可以控制SPF小鼠與偽無(wú)菌小鼠的體重增加、降低空腹血糖水平、提高胰島素敏感性、抑制脂肪累積還可以降低體內(nèi)炎癥水平；但是偽無(wú)菌小鼠與SPF小鼠對(duì)茶多酚減肥作用的響應(yīng)具有明顯差異。高脂飲食導(dǎo)致小鼠腸道菌群紊亂，茶多酚調(diào)控后得到改善。即便偽無(wú)菌小鼠減肥效果不及SPF小鼠，但是經(jīng)過(guò)茶多酚調(diào)控的偽無(wú)菌小鼠較單純攝取高脂飲食的偽無(wú)菌小鼠體重、炎癥水平等均有所改善。說(shuō)明腸道菌群是茶多