α-氰基丙烯酸酯與5-氟尿嘧啶復合物在預防移植靜脈再狹窄中的應(yīng)用研究.pdf

1、目的：冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG）是治療冠心?。–HD）的主要手段之一，而術(shù)后移植靜脈再狹窄嚴重影響了橋血管的通暢率和患者預后。α-氰基丙烯酸酯生物膠（α-Cyanoacrylate，α-CA）和5-氟尿嘧啶（5-fluorouraci，5-Fu）血管外局部用藥對預防移植靜脈內(nèi)膜增生及管腔狹窄都有積極明確的效果，本研究將二者進行復合形成新的血管外支持載藥應(yīng)用于大鼠自體頸靜脈動脈移植模型中，模擬CABG術(shù)后病理生理過程進行研究，驗證新理

2、念的可行性，為移植靜脈再狹窄的治療提供新思路和新方法。
　　方法：將48SD大鼠（雌雄不拘，周齡10-12周，體重220-280g），隨機分為4組：假手術(shù)組（sham group,S）、對照組（control group,C）、膠水組（α-cyanoacrylate，α-CA）、5-氟尿嘧啶組（5-fluorouraci，5-FU），每組12只大鼠。假手術(shù)組僅模擬手術(shù)過程，進行頸外靜脈游離，側(cè)枝結(jié)扎，不斷血管，不行移植；對照組行同

3、側(cè)頸靜脈-頸動脈移植；膠水組行同側(cè)頸靜脈-頸動脈移植，移植靜脈外涂抹α-CA膠；5-氟尿嘧啶組行同側(cè)頸靜脈-頸動脈移植，移植靜脈外涂抹α-CA膠與5-氟尿嘧啶復合物。應(yīng)用改良“CUFF”法進行建模。血清ELISA共分4個點進行檢測：T0：術(shù)前，T1：術(shù)后即刻，T2：術(shù)后36小時，T3：處死日，術(shù)后4周。ELISA法進行ET-1及TNF-α的檢測。術(shù)后4周處死實驗大鼠，肉眼觀察移植靜脈的變化，取新鮮橋血管固定保存后，進行HE染色，通過顯微

4、鏡及計算機圖像處理軟件觀察測定內(nèi)、中和外膜增生情況；進行αSMA免疫組織化學染色，觀測血管平滑肌細胞增值及遷移情況；進行RT-PCR技術(shù)測定移植靜脈αSMA的變化。
　　結(jié)果：各組手術(shù)均成功，術(shù)后觀察移植靜脈搏動有力，充盈良好。術(shù)后4周處死大鼠時，觀察移植靜脈情況，對照組一例閉塞，余血流通暢，對照組移植靜脈周圍有新鮮肉芽組織產(chǎn)生、不同程度的擴張、管壁增厚水腫稍僵硬，涂抹膠水組皆可觀察到膠水未降解，移植靜脈周圍組織有少量肉芽組織易分

5、離，與周圍組織分界清晰，未見明顯擴張。各組血清ET-1水平在0到36小時呈上升趨勢，假手術(shù)組在術(shù)后4周基本恢復術(shù)前水平，而對照組、膠水組、5-fu組術(shù)后4周仍維持在各自峰值水平。術(shù)前及術(shù)后即刻兩個時間點上，各組水平相當，術(shù)后36小時及術(shù)后4周各組水平開始出現(xiàn)差異：術(shù)后36小時及4周對照組、膠水組、5-fu組高于假手術(shù)組水平，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；術(shù)后36小時及術(shù)后4周膠水組和5-fu組低于對照組水平，差異有統(tǒng)計學意義（p<0

6、.05）；5-fu組術(shù)后36h水平低于膠水組，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。各組血清TNF-ɑ水平于術(shù)后即緩慢下降。對照組于術(shù)后36小時低于相對應(yīng)點的假手術(shù)組水平，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；膠水組及5-fu組術(shù)后36小時高于對應(yīng)點的對照組水平，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；5-fu組術(shù)后4周高于對應(yīng)點的對照組和膠水組水平，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）； HE染色后通過計算機圖像分析系統(tǒng)進行分析。內(nèi)膜：對照組、膠水組、

7、5-fu組厚度均高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；5-fu組厚度低于假手術(shù)組、對照組、膠水組，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；膠水組的厚度低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。中膜：對照組厚度高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；膠水組、5-fu組厚度低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。外膜：對照組厚度高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；5-fu組厚度低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（

8、p<0.05）。αSMA免疫組織化學染色可見假手術(shù)組術(shù)后4周內(nèi)膜及外膜可見少量陽性細胞；對照組術(shù)后4周內(nèi)中外膜均可見大量陽性細胞表達。膠水組可見中等量陽性細胞表達，以外膜居多；5-fu組內(nèi)膜陽性細胞表達少，外膜有中等量的表達?？梢妼φ战M大量平滑肌細胞遷移致內(nèi)膜并增生，膠水組可減少內(nèi)膜平滑肌細胞增生，平滑肌細胞向外膜遷移，5-fu組藥物干預后可明顯降低內(nèi)膜平滑肌細胞的增生。術(shù)后4周取移植靜脈行RT-PCR對αSMA進行檢測，M為MARK、